一、概述
厭氧培養(yǎng)箱是一種在無氧環(huán)境條件下進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)及操作的專用裝置。它能提供嚴(yán)格的厭氧狀態(tài)恒定的溫度培養(yǎng)條件和具有一個系統(tǒng)化、科學(xué)化的工作區(qū)域。在本裝置內(nèi)操作培養(yǎng),可以培養(yǎng)最難生長的厭氧生物,又能避免以往厭氧生物在大氣中操作時接觸氧而死亡的危險性。因此本裝置是厭氧生物檢測科研的理想工具。本裝置也是一物多用的良好儀器,如改變操作方法,為微氧菌的生長繁殖提供良好的生長條件。
二、特點
M4794型厭氧培養(yǎng)箱是由恒溫培養(yǎng)室、真空取樣室、厭氧操作室、氣路、電路控制系統(tǒng)、箱架、瓶架等部分組成。整機(jī)造型新穎,結(jié)構(gòu)緊湊,具有厭氧環(huán)境好,密封性能好,氣檢溫控精度高,穩(wěn)定性好,使用方便,省氣、經(jīng)濟(jì)、工作安全可靠優(yōu)點。其特點如下:
1.使用科學(xué)先進(jìn)手段達(dá)到厭氧環(huán)境的高精度、其恒定性能好,使用可靠。
2.培養(yǎng)箱溫控采用高指示精度的數(shù)字顯示溫度調(diào)節(jié)儀,不僅能準(zhǔn)確直觀地反映箱內(nèi)溫度,而且確保溫度調(diào)節(jié)器在失控的情況下,能自動進(jìn)行溫度再控制,是一套有效的限溫保護(hù)裝置,確保培養(yǎng)物在安全溫度環(huán)境條件下生長。
3.箱內(nèi)裝有紫外線殺菌燈,氣體經(jīng)過過濾后進(jìn)入箱內(nèi),可有效地避免雜菌污染。
4.氣路裝置,可任意準(zhǔn)確調(diào)節(jié)流量,能任意輸入各種所需氣體。
5.內(nèi)套均由不銹鋼板制成,光潔雅致,防腐耐用,活動式擱板支架造型新穎,使用方便。
6.操作室前窗采用厚透明特種玻璃制作,能清晰直接觀察室內(nèi)操作情況,操作使用塑膠手套可靠舒適、靈活,使用方便。
7.操作室內(nèi)備有特殊接種棒滅菌器,并附設(shè)有試管內(nèi)熔蠟裝置。
8.室內(nèi)裝有除氧催化器。
三、主要技術(shù)指標(biāo)
1.取樣室形成厭氧狀態(tài)時間小于5分鐘。
2.操作室形成厭氧時間小于1小時(抽氣充氣轉(zhuǎn)換)。
3.操作室在停止補(bǔ)充微量混合氣體的情況下,厭氧環(huán)境維持時間大于12小時。
4.使用溫度:室溫+0.3℃~50℃。
5.培養(yǎng)箱溫度波動≤±0.3℃;溫度分布均勻性±1.0℃。
6.操作室內(nèi)體積:高650毫米、寬920毫米、長600毫米,培養(yǎng)箱內(nèi)體積:高300毫米、寬250毫米、長200毫米。
7.電源220V±10%AC,功率:600W。
四、安裝
1.整機(jī)應(yīng)安放在溫差較小,操作方便的位置,應(yīng)避免陽光直曬和遠(yuǎn)離采暖設(shè)備。放置要平穩(wěn)。
2.將混合氣瓶、氮氣瓶,平穩(wěn)安放在瓶架上,并分別裝好減壓閥。(含壓力表),將瓶架置于機(jī)架下。
3.接上氣路并檢查氣路,為防止漏氣,必要時可在各接管處用密封膠粘合。
五、使用
(一)操作室厭氧環(huán)境形成
1.按使用要求放置好必要的附件和器具,并向操作室內(nèi)放入二個無毒塑料袋。
2.通電源開照明燈,開控溫儀,調(diào)節(jié)所需溫度及安全溫度。
3.操作室內(nèi)放入1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,并放入美蘭指示劑(封閉)。
4.關(guān)緊取樣室內(nèi)外門,并抽真空校驗。
5.操作室內(nèi)第一次置換。(氮氣置換)。
1) 先用橡皮管插入操作室內(nèi)進(jìn)氣口,另一頭插入塑料袋。
2) 接通氮氣控制閥,使二只塑料袋充足氮氣,然后扎緊塑料袋。
3) 把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊。
4) 把塑料袋內(nèi)氮氣漸漸地放于操作室內(nèi),至全部放出。
6.操作室第二次置換(氮氣置換)重復(fù)一次充氮過程,并注意隨時用腳踏開關(guān)開閉排氣。
7.操作室第三次置換(混合氣體置換)。(混合氣體配比為:N2↑85%、H2↑10%、CO2↑5%)
1) 調(diào)換氣路打開混合氣直通閥門進(jìn)氣,充氣時要隨時腳踏開關(guān)開閉排氣。
2) 混合氣充滿塑料袋后,關(guān)掉混合器直通閥(三通閥)使混合氣經(jīng)過穩(wěn)流器、流量計輸入操作并調(diào)整流量計,流量為每分鐘10毫升左右。
3) 把塑料袋內(nèi)混合氣體漸漸排出于操作室內(nèi)。
4) 通過三次換氣后,操作室內(nèi)氣體含氧量已處于極微量狀態(tài)。
8.操作室內(nèi)打開鈀粒除氧劑,接通除氧催化器電源進(jìn)行催化除氧,一小時后打開美蘭指示劑(美蘭安瓶)觀察其變色情況,不變色為操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境。
9.開紫外線滅菌燈,室內(nèi)進(jìn)行滅菌處理。滅菌時間自定。
(二)菌種的置入和培養(yǎng)
1.檢查取樣室內(nèi)門并關(guān)緊之。
2.打開取樣室外門,將菌種放入取樣室后即關(guān)上外門。
3.取樣室充氮置換三次過程:先抽真空度500毫米汞柱(66kpa)以上停,然后人式打開氮氣閥門進(jìn)氣,使指針回復(fù)零位后進(jìn)行下次操作。
4.如選室真空度較低就需要增加置換的次數(shù)。
5.取樣室內(nèi)外門開啟,關(guān)緊要抽低真空度100毫米汞柱(13kpa)檢驗及幫助操作。
6.厭氧培養(yǎng)箱需要長期連續(xù)使用的條件:
1) 每天在操作室內(nèi)打開美蘭指示劑觀察,正常情況下使用。如不正常就必須重新?lián)Q氣。
2) 要長期連續(xù)輸入微量的混合氣體,使補(bǔ)進(jìn)的氫氣能和微量的氧結(jié)合通過催化吸收,保證了室內(nèi)厭氧狀態(tài),補(bǔ)入混合氣流量選定為每分鐘10毫升左右。
3) 連續(xù)培養(yǎng)運(yùn)行一天,更換一次除氧劑和干燥劑。
7.接種棒滅菌器的應(yīng)用:
1) 隨時用鎳鉻電熱絲使電極短路而變赤熱以進(jìn)行殺菌(接種棒)。
2) 熔蠟處可直接放上,試管封蠟口旋轉(zhuǎn)熔蠟。
8.操作室內(nèi)培養(yǎng)箱內(nèi)室溫度可任意選擇和控制。
9.混合氣瓶、氮氣瓶輸出壓力調(diào)整:調(diào)節(jié)減壓閥,使輸出壓力為0.1Mpa左右。
六、注意事項
1.儀器盡可能地安裝于空氣清凈,溫度變化較小的地方。
2.開機(jī)前應(yīng)全面熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的說明書,掌握正確使用方法。
3.培養(yǎng)物放入必需是在操作室內(nèi)達(dá)到絕對厭氧環(huán)境后放入。
4.如發(fā)生故障(停氣等原因)操作室內(nèi)扔可保持12小時厭氧狀態(tài)。(超過12小時則根據(jù)需要把培養(yǎng)物取出另作處理)。
5.經(jīng)常注意氣路有無漏氣現(xiàn)象。
6.調(diào)換氣瓶時,注意要扎緊氣管,避免流入含氧氣體。
7.真空泵按要求使用,定期檢查加油。