醋酸纖維素薄膜是由醋酸纖維素加工制成的。醋酸纖維素薄膜作為是電泳支持體 有以下優(yōu)點(diǎn):①電泳后區(qū)帶界限清晰;②通電時(shí)間較短(二十分鐘至一小時(shí));③它 對(duì)各種蛋白質(zhì)(包括血清白蛋白,溶菌酶及核糖核酸酶)都幾乎完全不吸附,因此無(wú) 拖尾現(xiàn)象;④對(duì)染料也沒有吸附,因此不結(jié)合的染料能完全洗掉,無(wú)樣品處幾乎完全 無(wú)色。它的電滲作用雖高但很均一,不影響樣品的分離效果,由于醋酸纖維素薄膜吸 水量較低,因此必需在密閉的容器中進(jìn)行電泳,并使用較低有電流避免蒸發(fā)。
醋酸纖維素薄膜電泳已經(jīng)廣泛用于血清蛋白,血紅蛋白,球蛋白,脂蛋白,糖蛋 白,甲胎蛋白,類固醇及同工酶等的分離分析中,盡管它的分辨力比聚丙酰胺凝膠電 泳低,但它具有簡(jiǎn)單,快速等優(yōu)點(diǎn)。根據(jù)樣品理化性質(zhì),從提高電泳速度和分辨力出 發(fā)選擇緩沖液的種類,pH和離子強(qiáng)度。選擇好的緩沖液最好是揮發(fā)性強(qiáng),對(duì)顯色或紫 外光等觀察區(qū)帶沒有影響,若樣品含鹽量較高時(shí),宜采用含鹽緩沖液。例如血清蛋白 電泳可選用pH8.6的巴比妥緩沖液或硼酸緩沖液;氨基酸的分離則可選用pH7.2的磷酸 鹽緩沖液等。電泳時(shí)先將濾膜剪成一定長(zhǎng)度和寬度的紙條。在欲點(diǎn)樣的位置用鉛筆做 上記號(hào),點(diǎn)上樣品,在一定的電壓,電流下電泳一定時(shí)間,取下濾膜,進(jìn)行染色。不 同物質(zhì)需采用不同的顯色方法,如核苷酸等物質(zhì)可在紫外分析燈下觀察定位,但許多 物質(zhì)必須經(jīng)染色劑顯色。
醋酸纖維素薄膜電泳染色后區(qū)帶可剪下,溶于一定的溶劑中進(jìn)行光密度測(cè)定。也 可以浸于折射率為1.474的油中或其他透明液中使之透明,然后直接用光密度計(jì)測(cè) 定。它的缺點(diǎn)是厚度小,樣品用量很小,不適于制備。