制法：
　　A液：布氏桿菌肉湯　　　 970mL
　　無(wú)水磷酸氫二鈉　　　　　1.18g
　　無(wú)水磷酸二氫鉀　　　　　0.23g
　　瓊脂　　　　　　　　　　2g
　　加熱溶解，高壓滅菌，121℃ 15min。加入B液10%硫酸亞鐵(含7H2O)，C液10%偏亞硫酸氫鈉，D液10%丙酮酸鈉。
上述B、C、D溶液均新鮮配制，用除菌濾膜過(guò)濾。將此除菌溶液各1mL混合后再入A液中，無(wú)菌調(diào)pH到7.3，無(wú)菌分裝，每管3mL，塞緊備用。