環(huán)狀沉淀反應(yīng) 又稱環(huán)狀試驗(yàn)。主要用于抗原的定性試驗(yàn)。用已知抗體來檢測未知抗原。在小口徑試管中先加入已知抗血清,然后將待檢抗原小心地加在血清的表面,成為界面清晰的兩層。數(shù)分鐘后,兩界面交界處出現(xiàn)白色沉淀環(huán),為陽性反應(yīng)。本試驗(yàn)常用做抗原定性,如炭疽的診斷(Ascoli氏試驗(yàn))、鑒別血跡、媒介昆蟲的嗜血性等。
絮狀沉淀反應(yīng) 將抗原與相應(yīng)抗體在試管內(nèi)或凹玻片上混勻,如出現(xiàn)肉眼可見的絮狀沉淀物,為陽性反應(yīng)。如診斷梅毒的康氏反應(yīng)(Kahntest)。
瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn) 利用可溶性抗原與抗體在半固體瓊脂內(nèi)進(jìn)行擴(kuò)散,若抗原與抗體對(duì)應(yīng),并且比例適當(dāng),就會(huì)出現(xiàn)白色沉淀線,此為陽性反應(yīng)。瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)可在試管內(nèi)、平皿中以及玻片上的瓊脂中進(jìn)行。又可分為單向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)和雙向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)兩類。
單向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn) 是一種常用的定量檢測抗原的方法。將適量抗體與瓊脂混勻,澆注成板,凝固后,在板上打孔,孔中加入抗原,抗原就會(huì)向孔的四周擴(kuò)散,邊擴(kuò)散邊與瓊脂中的抗體結(jié)合。一定時(shí)間后,在兩者比例適當(dāng)處形成白色沉淀環(huán)。沉淀環(huán)的直徑與抗原的濃度成正比。如事先用不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)抗原制成標(biāo)準(zhǔn)曲線,則從曲線中可求出標(biāo)本中抗原的含量。本試驗(yàn)主要用于檢測標(biāo)本中各種免疫球蛋白和血清中各種補(bǔ)體成分的含量,敏感性很高。
雙向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn) 是將半固體瓊脂傾注于平皿內(nèi)或玻片上,待其凝固后,在瓊脂板上打孔,將抗原、抗體分別注入小孔內(nèi),使兩者相互擴(kuò)散。如果抗原、抗體相互對(duì)應(yīng),濃度、比例適當(dāng),則一定時(shí)間后,在抗原、抗體孔之間出現(xiàn)清晰可見的沉淀線。雙向瓊脂擴(kuò)散法可用來分析溶液中的多種抗原。一對(duì)抗原、抗體系統(tǒng)只能形成一條沉淀線,不同的抗原抗體系統(tǒng)在瓊脂中擴(kuò)散的速度不同,可在瓊脂中形成不同的沉淀線。本法主要是用于檢測血清中各種免疫球蛋白、甲胎蛋白、乙肝表面抗原等。缺點(diǎn)是需要時(shí)間過長,靈敏度不高。