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錨定PCR

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-01

  錨定PCR(Anchored PCR, A-PCR)主要用于分析具有可變末端的DNA序列,Loh等用A-PCR對(duì)人外周血淋巴細(xì)胞T細(xì)胞受體α-鏈的mRNA的多變性進(jìn)行了分析。先合成cDNA,并用末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶在其3’-可變區(qū)末端加上一個(gè)PolyG尾巴。Loh等恒定區(qū)與可變區(qū)連接部位設(shè)一個(gè)引物,另一個(gè)引物是一個(gè)具5’-polyG尾巴的引物。帶有PolyG尾巴的引物是一個(gè)固定點(diǎn),它可以并與PolyG尾巴結(jié)合,無論其余部分序列如何,只識(shí)別片段末端,利用此法可從前述mRNA中檢出至少20種不同序列,每一種都是獨(dú)特的,表明A-PCR不對(duì)任何特殊序列有傾向性結(jié)果,可用于T細(xì)胞、腫瘤及其它部位抗體基因的研究。

 

 

 
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