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吸附色譜法

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-06-28
吸附色譜法是指混合物隨流動相通過吸附劑時(shí),由于該吸附劑對不同物質(zhì)有不同的吸附力而使混合物分離的方法。該法是最早期的一種色譜分離技術(shù),主要應(yīng)用于某些分子量不大的物質(zhì)的分離提純,個(gè)別的如羥基磷灰石也適用于生物大分子的分離提純,應(yīng)用范圍比較廣。
  吸附是表面的一個(gè)重要性質(zhì)之一。任何兩相都可以形成表面,其中某相或溶解在某相中的溶質(zhì),在該表面的密集現(xiàn)象稱為吸附。在固體與氣體之間、固體與液體之間、液體與氣體之間都可以發(fā)生吸附現(xiàn)象。吸附過程是可逆的,被吸附物在一定條件下可以解吸出來,然后再吸附、再解吸,形成一個(gè)動態(tài)平衡。吸附色譜過程就是不斷地產(chǎn)生吸附與解吸的矛盾統(tǒng)一的過程。
凡是能夠?qū)⑵渌镔|(zhì)聚集到自己表面上的物質(zhì),都稱為吸附劑;聚集于吸附劑表面的物質(zhì)就成為吸附物。
  應(yīng)用最為廣泛的一種極性吸附劑,主要優(yōu)點(diǎn)是化學(xué)惰性,具有較大的吸附量。硅膠的吸附活性取決于含水量,當(dāng)含水量小于1%時(shí)活性最高,大于20%時(shí)吸附活性最低,一般采用含水量10-20%的硅膠。
  用硅膠進(jìn)行色譜分離時(shí),要提前進(jìn)行活化和純化。純化即降低硅膠活性,實(shí)驗(yàn)表明,硅膠加入4-20%水后,表面活性部位被純化,樣品溶質(zhì)在吸附劑上的吸附和解吸過程加快,同時(shí)傳質(zhì)作用得到改善,最終柱效大幅提高;罨侵冈150-195℃加熱硅膠,活化覆蓋有第一層小分子的硅膠,提高硅膠對樣品溶質(zhì)的吸附能力,其缺點(diǎn)是導(dǎo)致硅膠極性上升,產(chǎn)生催化反應(yīng)或不可逆吸附。
  此外常用的還有:1)氧化鋁 分為堿性氧化鋁、中性氧化鋁和酸性氧化鋁,其吸附活性與含水量關(guān)系很大,在一定溫度下除去水分可使氧化鋁活化;2)活性炭 分為粉末活性炭、顆粒活性炭和錦綸活性炭,其吸附能力在水溶液中最強(qiáng),使用前一般在150℃加熱4-5小時(shí),將吸附的大部分氣體除去,錦綸活性炭則在100℃以下進(jìn)行。3)聚酰胺 國外稱尼龍,國內(nèi)稱錦綸,特別適合低分子量化合物的分離,如酚、羧酸、DNP-氨基酸、醌幾芳香族化合物等。4)聚苯乙烯吸附劑 5)磷酸鈣 在無機(jī)吸附劑中,磷酸鈣是唯一適用于生物活性高分子物質(zhì)分離的吸附劑,主要用于蛋白質(zhì)的色譜分離、也適用于較小分子的核酸如轉(zhuǎn)運(yùn)RNA。
 

 

 
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