采血方法的選擇，決定于實(shí)驗(yàn)的目的所需血量以及動(dòng)物種類。凡用血量較少的檢驗(yàn)如紅、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白的測(cè)定，血液涂片以及酶活性微量分析法等，可刺破組織取毛細(xì)血管的血。當(dāng)需血量較多時(shí)可作靜脈采血。靜脈采血時(shí)，若需反復(fù)多次，應(yīng)自遠(yuǎn)離心臟端開(kāi)始，以免發(fā)生栓塞而影響整條靜脈。例如，研究毒物對(duì)肺功能的影響、血液酸堿平衡、水鹽代謝紊亂，需要比較動(dòng)、動(dòng)脈血氧分壓、二氧化碳分壓和血液pH值以及 K 、Na 、CI-離子濃度，必須采取動(dòng)脈血液。 采血時(shí)要注意：⑴采血場(chǎng)所有充足的光線；室溫夏季最好保持在25-28℃，冬季，15-20℃為宜；⑵采血用具有采用部位一般需要進(jìn)行消毒；⑶采血用的注射器和試管必須保持清潔干燥；⑷若需抗凝全血，在注射器或試管內(nèi)需預(yù)先加入抗凝劑.
１．取少量血
ａ．尾靜脈 大鼠、小鼠
ｂ．耳靜脈 兔、狗、貓、豬、山羊、綿羊
ｃ．眼底靜脈叢 兔、大鼠、小鼠
d．舌下靜脈 兔
e．腹壁靜脈 青蛙、蟾蜍
f．冠、腳蹼皮下靜脈 雞、鴨、鵝
２．取中量血
ａ．后肢外側(cè)皮下小隱靜脈 狗、猴、貓
ｂ．前肢內(nèi)側(cè)皮下頭靜脈 狗、猴、貓
ｃ．耳中央動(dòng)脈 兔
ｄ．頸靜脈 狗、貓、兔
ｅ．心臟 豚鼠、大鼠、小鼠
ｆ．?dāng)囝^ 大鼠、小鼠
ｇ．翼下靜脈 雞、鴨、鴿、鵝
ｈ．頸動(dòng)脈 雞、鴨、鴿、鵝
３．取大量血
ａ．股動(dòng)脈、頸動(dòng)脈 狗、猴、貓、兔
ｂ．心臟 狗、猴、貓、兔
ｃ．頸靜脈 馬、牛、山羊、綿羊
ｄ．摘眼球 大鼠、小鼠
采動(dòng)物品種 最大安全采血量(ml) 最小致死采血量(ml)
小 鼠 0.2 0.3
大 鼠 1 2
豚 鼠 5 10
兔 10 40
狼 狗 100 500
獵 狗 50 200
猴 15 60
1.割(剪)尾采血 當(dāng)所需血量很少時(shí)采用本法。固定動(dòng)物并露出鼠尾。將尾部毛剪去后消毒，然后浸在45℃左右的溫水中數(shù)分鐘，使尾部血管充盈。再將尾擦干，用銳器(刀或剪刀)割去尾尖0.3-0.5cm，讓血液自由滴入盛器或用血紅蛋白吸管吸取，采血結(jié)束，傷口消毒并壓迫止血。也可在尾部作一橫切口，割破尾動(dòng)脈或靜脈，收集血液的方法同上。每鼠一般可采血10余次以上。小鼠每次可取血0.1ml，大鼠0.3～0.5ml。
2.鼠尾刺血法 大鼠用血量不多時(shí)(僅做白細(xì)胞計(jì)數(shù)或血紅蛋白檢查)，可采用本法。先將鼠尾用溫水擦拭，再用酒精消毒和擦拭，使鼠尾充血。用7號(hào)或8號(hào)注射針頭，刺入鼠尾靜脈，拔出針頭時(shí)即有血滴出，一次可采集10～50mm3。如果長(zhǎng)期反復(fù)取血，應(yīng)先靠近鼠尾末端穿刺，以后再逐漸向近心端穿刺。
3.眼眶靜脈叢采血 采血者的左手拇食兩指從背部較緊地握住小鼠或大鼠的頸部(大鼠采血需帶上紗手套)，應(yīng)防止動(dòng)物窒息。當(dāng)取血時(shí)左手拇指及食指輕輕壓迫動(dòng)物的頸部?jī)蓚?cè)，使眶后靜脈叢充血。右手持續(xù)接7號(hào)針頭的1ml注射器或長(zhǎng)頸(3～4cm)硬質(zhì)玻璃滴管(毛細(xì)管內(nèi)徑0.5-1.0mm)，使采血器與鼠面成45℃的夾角，由眼內(nèi)角刺入，針頭斜面先向眼球，刺入后再轉(zhuǎn)180度使斜面對(duì)著眼眶后界。刺入濃度，小鼠約2～3mm，大鼠約4～5mm。當(dāng)感到有阻力時(shí)即停止推進(jìn)，同時(shí)，將針退出約0.1-0.5mm，邊退邊抽。若穿刺適當(dāng)血液能自然流入毛細(xì)管中，當(dāng)?shù)玫剿璧难亢螅闯ゼ佑陬i部的壓力，同時(shí)，將采血器拔出，以防止術(shù)后穿刺孔出血。 若技術(shù)熟練，用本法短期內(nèi)可重復(fù)采血均無(wú)多大困難。左右兩眼輪換更好。體重20-25g的小鼠每次可采血 0.2-0.3ml；體重200-300g大鼠每次可采血0.5-1.0ml，可適用于某些生物化學(xué)項(xiàng)目的檢驗(yàn)。
4.斷頭取血 采血者的左手拇指和食指以背部較緊地握住大(小)鼠的頸部皮膚，并作動(dòng)物頭朝下傾的姿勢(shì)。右手用剪刀猛剪鼠頸，約1/2-4/5的頸部前剪斷，讓血自由滴入盛器。小鼠可采用約0.8～1.2ml;大鼠約5-10ml。
5.心臟采血 鼠類的心臟較小，且心率較快，心臟采血比較困難，故少用�；铙w采血方法與豚鼠相同。若做開(kāi)胸一次死亡采血，先將動(dòng)物作深麻醉，打開(kāi)胸腔，暴露心臟，用針頭刺入右心室，吸取血液。小鼠約0.5-0.6ml；大鼠約0.8-1.2ml。
6.頸動(dòng)靜脈采血 先將動(dòng)物仰位固定，切開(kāi)頸部皮膚，分離皮下結(jié)締組織，使頸靜脈充分暴露，可用注射器吸出血液。在氣管兩側(cè)分離出頸動(dòng)脈，離心端結(jié)扎，向心端剪口將血滴入試管內(nèi)。
7.腹主動(dòng)脈采血 最好先將動(dòng)物麻醉，仰臥固定在手術(shù)架上，從腹正中線皮膚切開(kāi)腹腔，使腹主動(dòng)脈清楚暴露。用注射器吸出血液，防止溶血�；蛴脽o(wú)齒鑷子剝離結(jié)締組織，夾住動(dòng)脈近心端，用尖頭手術(shù)剪刀，剪斷動(dòng)脈，使血液噴入盛器。
8.股動(dòng)(靜)脈采血 先由助手握住動(dòng)物，采血者左手拉直動(dòng)物下肢，使靜脈充盈。或者以搏動(dòng)為指標(biāo)，右手用注射器刺入血管。體重15-20g 小鼠采血約0.2-0.8ml，大鼠約0.4-0.6ml。
豚鼠采血法
1.耳緣剪口采血 將耳消毒后，用銳器(刀或刀片)割破耳緣，在切口邊緣涂抹20%檸檬酸鈉溶液，阻止血凝，則血可自切口自動(dòng)流出，進(jìn)入盛器。操作時(shí)，使耳充血效果較好。此法能采血0.5ml左右。
2.心臟采血 取血前應(yīng)探明心臟搏動(dòng)最強(qiáng)部位，通常在胸骨左緣的正中，選心跳最顯的部位作穿刺。針頭宜稍細(xì)長(zhǎng)些，以免發(fā)生手術(shù)后穿刺孔出血，其操作手法詳見(jiàn)兔心臟采血。因豚鼠身體較小，一般可不必將動(dòng)物固定在解剖臺(tái)上，而可由助手握住前后肢進(jìn)行采血即可。成年豚鼠每周采血應(yīng)不超過(guò)10ml為宜。
3.肌動(dòng)脈采血 將動(dòng)脈仰位固定在手術(shù)臺(tái)上，剪去腹股溝區(qū)的毛，麻醉后，局部用碘酒消毒。切開(kāi)長(zhǎng)約2-3cm的皮膚，使股動(dòng)脈暴露及分離。然后，用鑷子提起股動(dòng)脈，遠(yuǎn)端結(jié)扎，近端用止血鉗夾住，在動(dòng)脈中央剪一小孔，用無(wú)菌玻璃小導(dǎo)管或聚乙烯、聚四氟乙烯管插入，放開(kāi)止血鉗，血液即導(dǎo)管口流出。一次可采血10-20ml。
4.背中足靜脈取血 助手固定動(dòng)物，將其右或左右膝關(guān)節(jié)伸直提到術(shù)者面前。術(shù)者將動(dòng)物腳背面用酒精消毒，找出背中足靜脈后，以左手的拇指和食指拉住豚鼠的趾端，右手拿的注射針刺入靜脈。拔針后立即出血，呈半球狀隆起。采血后，用紗布或脫脂棉壓迫止血。反復(fù)采血時(shí)，兩后肢交替使用。
兔采血法
1.耳靜脈采血 本法為最常用的取血法之一，常作多次反復(fù)取血用，因此，保護(hù)耳緣靜脈，防止發(fā)生栓塞特別重要。 將兔放入僅露出頭部及兩耳的固定盒中，或由助手以手扶住。選耳靜脈清晰的耳朵，將耳靜脈部位的毛拔去，用75%酒精局部消毒，待干。用手指輕輕摩擦兔耳，使靜脈擴(kuò)張，用連有5(1/2)號(hào)針頭的注射器在耳緣靜脈末端刺破血管待血液漏出取血或?qū)⑨橆^逆血流方向刺入耳緣靜脈取血，取血完畢用棉球壓迫止血，此種采血法一次最多可采血5-10ml。
(2.耳中央動(dòng)脈采血 將兔置于兔固定筒內(nèi)，在兔耳的中央有一條較粗、顏色較鮮紅的中央動(dòng)脈，用左手固定兔耳，右手取注射器，在中央動(dòng)脈的末端，沿著動(dòng)脈平行地向心方向刺入動(dòng)脈，即可見(jiàn)動(dòng)脈血進(jìn)入針筒，取血完畢后注意止血。此法一次抽血可達(dá)15ml。但抽血時(shí)應(yīng)注意，由于兔耳中央動(dòng)脈容易發(fā)生痙攣性收縮，因此抽血前，必須先讓兔耳充分充血，當(dāng)動(dòng)脈擴(kuò)張，未發(fā)生痙攣性收縮之前立即進(jìn)行抽血，如果等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，動(dòng)脈經(jīng)常會(huì)發(fā)生較長(zhǎng)時(shí)間的痙攣性收縮。取血用的針頭一般用6號(hào)針頭，不要太細(xì)。針刺部位從中央動(dòng)脈末端開(kāi)始。不要在近耳根部取血，因耳根部軟組織厚，血管位置略深，易刺透血管造成皮下出血。
3.心臟取血 將家兔仰臥固定，在第三肋間胸骨左緣3毫米處注射針垂直刺入心臟，血液隨即進(jìn)入針管。注意事項(xiàng)有：⑴動(dòng)作宜迅速，以縮短在心臟內(nèi)的留針時(shí)間和防止血液凝固；⑵如針頭已進(jìn)入心臟但抽不出血時(shí)，應(yīng)將針頭稍微后退一點(diǎn)。⑶在胸腔內(nèi)針頭不應(yīng)左右擺動(dòng)以防止傷及心，肺、一次可取血20-25ml。
4.后肢脛部皮下靜脈取血 將兔仰臥固定于兔固定板上，或由一人將兔固定好。拔去脛部被毛，在脛部上端股部扎以橡皮管，則在脛部外側(cè)淺表皮下，可清楚見(jiàn)到皮下靜脈。用左手兩指固定好靜脈，右手取帶有5(1/2)號(hào)針頭的注射器內(nèi)皮下靜脈平行方向刺入血管，抽一下針?biāo)�，如血進(jìn)入注射器，表示針頭已刺入血管，即可取血。一次可取2～5ml。取完后必須用棉球壓迫取血部位止血，時(shí)間要略長(zhǎng)些，因此處不易止血。如止血不妥，可造成皮下血腫，影響連續(xù)多次取血。
5.股靜脈、頸靜脈取血 先作股靜脈和頸靜脈暴露分離手術(shù)
⑴股靜脈取血 注射器平行于血管，從股靜脈下端向心方向刺入，徐徐抽動(dòng)針?biāo)纯扇⊙�。抽血完畢后要注意止血。股靜脈較易止血，用于紗布輕壓取血部位即可。若連續(xù)多次取血，取血部位宜盡量選擇靠離心端。
⑵外頸靜脈取血 注射器由近心端(距頸靜脈分支2-3厘米處)向頭側(cè)端順血管平等方向刺入，使注射針一直引深至頸靜脈分支叉處，即可取血。此處血管較粗，很容易取血，取血量也較多，一次可取10ml以上。取血完畢，拔出針頭，用干紗布輕輕壓迫取血部位也易止血。兔急性實(shí)驗(yàn)的靜脈取血，用此法較方便。
狗、貓采血法
1.后肢外側(cè)小隱靜脈和前肢內(nèi)側(cè)下頭靜脈采血 此法最常用，且方便。后肢外側(cè)小隱靜脈在后肢脛部下1/3的外側(cè)淺表的皮下，由前側(cè)方向后行走。抽血前，將狗固定在狗架上或使狗側(cè)臥，由助手將狗固定好。將抽血部位的毛剪去，碘酒一酒精消毒皮膚。采血者左手拇指和食指握緊剪毛區(qū)上部，使下肢靜脈充盈，右手用連有6號(hào)或7號(hào)針頭的消毒器迅速穿刺入靜脈，左手放松將針固定，以適當(dāng)速度抽血(以無(wú)氣泡為宜)�；�?qū)⒛z皮帶綁在狗股部，或由助手握緊股部，即可，若僅需少量血液，可以不用注射器抽取，只需用針頭直接刺入靜脈，待血從針孔自然滴出，放入盛器或作涂片。 采集前肢內(nèi)側(cè)皮下的頭靜脈血時(shí)，操作方法基本與上述相同。一只狗一般采10-20ml血并不困難。
2.股動(dòng)脈采血 本法為采取狗動(dòng)脈血最常用的方法。操作也較簡(jiǎn)便。稍加以訓(xùn)練的狗，在清醒狀態(tài)下將狗臥位固定于狗解剖臺(tái)上。伸展后肢向外伸直，暴露腹肥肉溝三角動(dòng)脈搏動(dòng)的部位，剪去毛。用碘酒消毒。左手中指、食指探摸股動(dòng)脈跳動(dòng)部位，并固定好血管，右手取連有5(1/2)號(hào)針頭的注射器，針頭由動(dòng)脈跳動(dòng)處直接刺入血管，若刺入動(dòng)脈一般可見(jiàn)鮮紅血液流入注射器，有時(shí)還需微微轉(zhuǎn)動(dòng)一下針頭或上下移動(dòng)一下針頭，方見(jiàn)鮮血流入。有時(shí)，往往刺入靜脈，必須重抽之。待抽血完畢，迅速拔出針頭，用干藥棉壓迫止血2～3分鐘。
3.心臟采血 本法最好在麻醉下進(jìn)行，馴服的狗不麻醉也行。將固定在手術(shù)臺(tái)上，前肢向背側(cè)方向固定，暴露胸部，將左側(cè)第3-5肋間的被毛剪去，用碘酒-酒精消毒皮膚。采血者用左手觸摸左側(cè)3-5肋間處，選擇心跳最顯處穿刺。一般選擇胸骨左緣外1cm第4肋間處。取連有6(1/2)號(hào)針頭的注射器，由上述部位進(jìn)針，并向動(dòng)物背側(cè)方向垂直刺入心臟。采血者可隨針接觸心跳的感覺(jué)，隨時(shí)調(diào)整刺入方向和濃度，擺動(dòng)的角度盡量小，避免損傷心肌過(guò)重，或造成胸腔大出血。當(dāng)針頭正確刺入心臟時(shí)，血即可進(jìn)入抽射器，可抽取多量血液。
4.耳緣靜脈采血 本法宜取少量血液作血常規(guī)或微量酶活力檢查等。有訓(xùn)練的狗不必綁嘴，剪去耳尖部短毛，即可見(jiàn)耳緣靜脈，手法基本與兔相同。
5.頸靜脈 狗不需麻醉，經(jīng)訓(xùn)練的狗不需固定，未經(jīng)訓(xùn)練的狗應(yīng)予固定。取側(cè)臥位，剪去頸部被毛約10×3cm2范圍，用碘酒、酒精消毒皮膚。將狗頸部拉直，頭盡量后抑。用左手拇指壓住頸靜脈入胸部位的皮膚。使頸靜脈怒張，右手取連有6(1/2)號(hào)針頭的注射器。針頭沿血管平行方向向心端刺往前血管。由于此靜脈在皮下易滑動(dòng)，針刺時(shí)除用左手固定好血管外，刺入要準(zhǔn)確。取血后注意壓迫止血。采用此法一次可取較多量的血。 貓的采血法基本與狗相同。常采用前肢皮下頭靜脈、后肢的股靜脈、耳緣靜脈取血。需大量血液時(shí)可從頸靜脈取血。方法見(jiàn)前述。
猴采血法
與人類的采血法相似，常用者有以下幾種：
1.毛細(xì)血管采血 需血量少時(shí)，可在猴拇指或足跟等處采血。采血方法與人的手指或耳垂處的采血法相同。
2.靜脈采血 最宜部位是后肢皮下靜脈及外頸靜脈。后肢皮下靜脈的取血法與狗相似。 用外頸靜脈采血時(shí)，把猴固定在猴臺(tái)上，側(cè)臥，頭部略低于臺(tái)面，助手固定猴的頭部與肩部。先剪去頸部的毛，用碘酒-酒精消毒，即可見(jiàn)位于上頜角與鎖骨中點(diǎn)之間的怒張的外頸靜脈。用左手拇指按住靜脈，右手持連6(1/2)號(hào)針頭的注射器，其它操作與人的靜脈取血同。 也可在肘窩、腕骨、手背及足背選靜脈采血。但這些靜脈更細(xì)、易滑動(dòng)、穿刺難，血流出速度慢。
3.動(dòng)脈采血 股動(dòng)脈可觸及。取血量多時(shí)常被優(yōu)先選用，手法與狗股動(dòng)脈采血相似。此外，肱動(dòng)脈與橈動(dòng)脈也可用。
小鼠采血的幾個(gè)問(wèn)題：
1。最大安全采血量：小鼠循環(huán)血量占體重的6%，或50-70mi/kg
采血占全血量的10%不會(huì)對(duì)機(jī)體造成嚴(yán)重的不良影響。3-4周后可以重新采集一次。
特別注意的是：老年小鼠血量降低。疾病會(huì)加重不良反應(yīng)，所以必須考慮這些影響因素。
采血后應(yīng)補(bǔ)充響應(yīng)體積的液體
如果需要很短時(shí)間反復(fù)采血，比如每天一次，每次的采血量不應(yīng)超過(guò)全血的1%。
30g*6%=血量1.8mls
1.8mls*10%=0.18mls(最大安全采血量)
2。隱靜脈采血法
隱靜脈采血法是小量、反復(fù)小鼠采血的常用方法。特點(diǎn)是不用麻醉
3。頸靜脈采血法
隱靜脈采血法也是小量、反復(fù)小鼠采血的常用方法。特點(diǎn)是需要麻醉
4。心臟穿刺采血法。
麻醉動(dòng)物
將動(dòng)物仰放
局部酒精消毒
用塑料注射器，從動(dòng)物的左側(cè)胸部，肋沿下，心尖部向右側(cè)15-30度角刺入心臟，給小負(fù)壓，小心操作