(1)切片在二甲苯中脫蠟5~10分鐘。(2)移入二甲苯和純酒精(1∶1)混合液中5分鐘左右(如經(jīng)二次二甲苯脫蠟,此步可略)。(3)入100%、95%、85%、70%酒精,各級(jí)為2~5分鐘。最后經(jīng)蒸餾水轉(zhuǎn)入染液。(4)蘇木精染液染色5~15分鐘。(5)水洗玻片上多余染液,0.5~1%鹽酸酒精(70%酒精配制)分色片刻。鏡檢控制,直至細(xì)胞核及核內(nèi)染色質(zhì)清晰為止,約數(shù)10秒鐘。(6)流水沖洗15~30分鐘,或者在碳酸鋰飽和液中短時(shí)間堿化或藍(lán)化,即細(xì)胞核呈藍(lán)色。(7)蒸餾水短洗。(8)0.1~0.5%伊紅染液染色1~5分鐘,若著色困難,可在每100毫升染液中加入1~2滴冰醋酸,使易著色且不易脫色。(9)依次經(jīng)70%、85%、95%、100%酒精脫水,各級(jí)為2~3分鐘,在95%以下濃度的酒精中伊紅易脫色,應(yīng)適當(dāng)縮短時(shí)間。(10)二甲苯透明(二次),共約10分鐘。(11)封片:擦去切片周圍多余二甲苯,切勿干涸,迅速滴加適量中性樹(shù)膠,再加蓋玻片封固。