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高通量細(xì)胞篩選技術(shù)(high throughput cell-based screening tech

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-08

高通量細(xì)胞篩選技術(shù)(high2throughput cell-based screening technology) 是以高通量方式研究基因功能最有效的方法之一。通常,基因功能的初步篩選在96 孔或384 孔板上進(jìn)行,通過基因轉(zhuǎn)染將候選基因?qū)爰?xì)胞,或直接將基因表達(dá)產(chǎn)物加入細(xì)胞培養(yǎng)液中。篩選測(cè)定方法基于要研究的生物學(xué)或醫(yī)學(xué)問題,例如,要研究抗血管生成活性,選用內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞生長、分化、遷移和粘附等分析測(cè)定;研究免疫調(diào)節(jié)活性,可選擇淋巴細(xì)胞或造血細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞生長和分化的分析測(cè)定;研究神經(jīng)營養(yǎng)因子活性,可選用神經(jīng)細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞存活、突起生長測(cè)定。除上述與細(xì)胞表型或形態(tài)學(xué)相關(guān)的檢測(cè)指標(biāo)外,細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路、糖代謝、能量產(chǎn)生和代謝產(chǎn)物分析(metabolic control analysis) 等代謝通路也是基因功能重要的研究內(nèi)容。

  結(jié)合抗體芯片技術(shù)、多路測(cè)定技術(shù)(multiplexing) 等新的檢測(cè)方法[12~14 ] ,高通量細(xì)胞篩選的應(yīng)用更為廣泛。另外,隨著熒光成像讀板儀(fluorescence image plate reader ,FLIPR) 、定量PCR、高通量熒光激活細(xì)胞分類器(HT2FACS) 等檢測(cè)方法和技術(shù)的不斷發(fā)展和應(yīng)用,靈敏度和重現(xiàn)性這兩個(gè)高通量細(xì)胞篩選的關(guān)鍵問題也逐步得以解決。

初篩得到的基因通常選用二級(jí)分析模型進(jìn)行功能驗(yàn)證,驗(yàn)證方法可能通量略低,但與功能的相關(guān)性更強(qiáng)。


 

 

 
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