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食源性致病菌如何檢測?

已解決 懸賞分:0 提問時(shí)間 2008-12-22 14:31 - 解決時(shí)間 2008-12-23 11:21
食源性致病菌如何檢測?
4620 次關(guān)注     提問者: 瑩晶  
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副溶血性弧菌
副溶血性弧菌根據(jù)菌體O抗原不同,現(xiàn)已有13個(gè)血清群。主要引起食物中毒。副溶血性弧菌進(jìn)入人體后會在消化道內(nèi)迅速繁殖生長,產(chǎn)生大量的腸毒素;颊邥霈F(xiàn)劇烈腹痛、腹瀉、嘔吐和發(fā)熱,大多數(shù)患者會中度脫水。如果搶救不及時(shí),患者會因?yàn)閲?yán)重脫水而有生命危險(xiǎn)。
1.常規(guī)分離鑒定技術(shù)
   分離、鑒定:糞便、肛拭、嘔吐物、可疑中毒食物及相關(guān)的容器涂拭物等,采用直接分離與增菌分離進(jìn)行檢測。檢測方法參照何曉青(1991年)專著進(jìn)行。副溶血性弧菌選擇性平板采用科瑪嘉顯色平板,其菌落特征較典型。副溶血性弧菌的定量監(jiān)測方法。可參照以最大可有數(shù)(MPN)方法進(jìn)行測定。
副溶血性弧菌鑒定方法包括生化鑒定、小鼠毒力試驗(yàn)、神奈川(KP)試驗(yàn),KP很可能就是致病菌株。耐熱溶血素檢測,參照GB/T4789。7-2003,F(xiàn)DA等檢驗(yàn)方法,通過以上鑒定技術(shù),確定副溶血性弧菌及其毒力情況。
PCR檢測技術(shù)應(yīng)用:副溶血性弧菌的耐熱溶血素及耐熱相關(guān)溶血素基因通過PCR擴(kuò)增,在食源性疾病相關(guān)標(biāo)本中直接檢測毒力基因,該方法具有快速簡便的特點(diǎn),為食源性疾病的快速診斷提高有效的依據(jù)。檢測副溶血性弧菌特有的基因片段(Pr72H)的方法,也可進(jìn)行鑒定是否為副溶血性弧菌。
血清抗體檢測:取急性及恢復(fù)期雙份血清做間接凝血試驗(yàn):取急性及恢復(fù)期雙份血清做間接凝血試驗(yàn),抗體效價(jià)呈4倍或以上增長,即可確診。副溶血性弧菌抗體產(chǎn)生較早,一周之內(nèi)可有明顯升高,以后迅速下降。
2.流行病學(xué)分型技術(shù)
血清分型技術(shù):副溶血性弧菌可分為13個(gè)血清群及67個(gè)K抗原因
子血清型。菌體須以121℃高壓滅菌1小時(shí)后進(jìn)行凝集試驗(yàn),近年來副溶血性弧菌流行的血清型以O(shè)3:K6為多見。
    分子流行病分型技術(shù):目前在副溶血性弧菌分子流行病學(xué)采用的方法有:PFGE、多重PCR、核酸體分型以及隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性核糖核酸技術(shù)(RAPD)等
  回答者: nellyning   2008-12-23 11:21   


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