亚洲成aⅴ人在线观看_亚洲欧美日韩综合一区在线观看_国产无码电影一区二区三区_国语精品91自产拍在线观看二区

食品伙伴網(wǎng)服務號
當前位置: 首頁 » 檢驗技術(shù) » 培訓資料及講義 » 正文

致瀉性大腸桿菌的檢驗(GB方法簡介)

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2010-05-13
核心提示:增菌  以無菌手續(xù)稱取檢驗25g,加在225mL營養(yǎng)肉湯中,以均質(zhì)器打碎1min或用乳缽加滅菌砂磨碎。取出適量,接種乳糖膽鹽培養(yǎng)基

增菌
  以無菌手續(xù)稱取檢驗25g,加在225mL營養(yǎng)肉湯中,以均質(zhì)器打碎1min或用乳缽加滅菌砂磨碎。取出適量,接種乳糖膽鹽培養(yǎng)基,以測定大腸菌群MPN,其余的移入500mL廣口瓶內(nèi),于36±1℃培養(yǎng)6h。挑取1環(huán),接種于1管30mL腸道菌增菌肉湯內(nèi),于42℃培養(yǎng)18h。

分離
  將乳糖發(fā)酵陽性的乳糖膽鹽發(fā)酵管和增菌液分別劃線接種麥康凱或伊紅美藍瓊脂平板;污染嚴重的檢樣,可將檢樣勻液直接劃線接種麥康凱或伊紅美藍平板,于36±1℃培養(yǎng)18~24h,觀察菌落。不但要注意乳糖發(fā)酵的菌落,同時也要注意乳糖不發(fā)酵和遲緩發(fā)酵的菌落。

  附:麥康凱瓊脂平板照片

    EMB平板原理及照片

生化試驗:
 自鑒別平板上直接挑取數(shù)個菌落分別接種三糖鐵瓊脂(TSI)或克氏雙糖鐵瓊脂(KI)。同時將這些培養(yǎng)物分別接種蛋白胨水、半固體、pH7.2尿素瓊脂、KCN肉湯和賴氨酸脫羧酶試驗培養(yǎng)基。以上培養(yǎng)物均在36℃培養(yǎng)過夜。
 TSI斜面產(chǎn)酸或不產(chǎn)酸,底層產(chǎn)酸,H2S陰性,KCN陰性和尿素陰性的培養(yǎng)物為大腸埃希氏菌。TSI底層不產(chǎn)酸,或H2S、KCN、尿素有任一項為陽性的培養(yǎng)物,均非大腸埃希氏菌。必要時做氧化酶試驗和革蘭氏染色。
  

  附:三糖鐵瓊脂(TSI)原理及照片

    克氏雙糖鐵瓊脂照片

    尿素酶試驗原理及照片

    血清學試驗
  假定試驗:挑取經(jīng)生化試驗證實為大腸埃希氏菌的瓊脂培養(yǎng)物,用致病性大腸埃希氏菌、侵襲性大腸埃希氏菌和產(chǎn)腸毒素大腸埃希氏菌多價O血清和出血性大腸埃希氏菌O157血清做玻片凝集試驗。

  當與某一種多價O血清凝集時,再與該多價血清所包含的單價O血清做試驗。如與某一個單價O血清呈現(xiàn)強凝集反應,即為假定試驗陽性。

  證實試驗:制備O抗原懸液,稀釋至與Mac Farland3號比濁管相當?shù)臐舛。原效價為1:160~1:320的O血清,用0.5%鹽水稀釋至1:40。稀釋血清與抗原懸液在10mm×75mm試管內(nèi)等量混合,做單管凝集試驗;靹蚝蠓庞50℃水浴箱內(nèi),經(jīng)16h后觀察結(jié)果。如出現(xiàn)凝集,可證實為該O抗原。
  附:致瀉性大腸桿菌及O血清。

腸毒素試驗(產(chǎn)毒素性大腸桿菌)(LT-不耐熱腸毒素,ST-耐熱腸毒素)
  1 酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測LT和ST。
  2 雙向瓊脂擴散試驗檢測LT
  3 乳鼠罐胃試驗檢測ST

   附:腸毒素試驗
  
結(jié)果報告
  綜合以上生化試驗、血清學試驗、腸毒素試驗作出報告。

編輯:foodyy

 
分享:
關(guān)鍵詞: 致瀉性大腸桿菌
 

 
 
推薦圖文
推薦檢驗技術(shù)
點擊排行
檢驗技術(shù)
 
 
Processed in 0.161 second(s), 15 queries, Memory 0.91 M