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消毒和滅菌兩個(gè)概念有區(qū)別么?微生物檢測(cè)中常用的滅菌和消毒方法匯總!

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2020-10-21
核心提示:消毒和滅菌兩個(gè)詞在實(shí)際使用中常被混用,其實(shí)它們的含義是有所不同的。消毒是指應(yīng)用消毒劑等方法殺滅物體表面和內(nèi)部的病原菌營(yíng)養(yǎng)

消毒和滅菌兩個(gè)詞在實(shí)際使用中常被混用,其實(shí)它們的含義是有所不同的。消毒是指應(yīng)用消毒劑等方法殺滅物體表面和內(nèi)部的病原菌營(yíng)養(yǎng)體的方法,而滅菌是指用物理和化學(xué)方法殺死物體表面和內(nèi)部的所有微生物,使之呈無(wú)菌狀態(tài)。

 

一、物理方法


1、溫度

利用溫度進(jìn)行滅菌、消毒或防腐,是最常用而又方便有效的方法。高溫可使微生物細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)和酶類(lèi)發(fā)生變性而失活,從而起滅菌作用,低溫通常起抑菌作用。

1)干熱滅菌法:

a.灼燒滅菌法:利用火焰直接把微生物燒死。此法徹底可靠,滅菌迅速,但易焚毀物品,所以使用范圍有限,只適合于接種針、環(huán)、試管口及不能用的污染物品或?qū)嶒?yàn)動(dòng)物的尸體等的滅菌。

b.干熱空氣滅菌法:這是實(shí)驗(yàn)室中常用的一種方法,即把待滅菌的物品均勻地放入烘箱中,升溫至160℃,恒溫1小時(shí)即可。此法適用于玻璃皿、金屬用具等的滅菌。

 

2)濕熱滅菌法:

在同樣的溫度下,濕熱滅菌的效果比干熱滅菌好,這是因?yàn)橐环矫婕?xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)含水量高,容易變性。另一方面高溫水蒸汽對(duì)蛋白質(zhì)有高度的穿透力,從而加速蛋白質(zhì)變性而迅速死亡。

a.巴氏消毒法:有些食物會(huì)因高溫破壞營(yíng)養(yǎng)成分或影響質(zhì)量,如牛奶、醬油、啤酒等,所以只能用較低的溫度來(lái)殺死其中的病原微生物,這樣既保持食物的營(yíng)養(yǎng)和風(fēng)味,又進(jìn)行了消毒,保證了食品衛(wèi)生。該法一般在62℃,30分鐘即可達(dá)到消毒目的。此法為法國(guó)微生物學(xué)家巴斯德首創(chuàng),故名為巴氏消毒法。

b.煮沸消毒法:直接將要消毒的物品放入清水中,煮沸15分鐘,即可殺死細(xì)菌的全部營(yíng)養(yǎng)和部分芽孢。若在清水中加入1%碳酸鈉或2%的石炭酸,則效果更好。此法適用于注射器、毛巾及解剖用具的消毒。

c.間歇滅菌法:上述兩種方法在常壓下,只能起到消毒作用,而很難做到完全無(wú)菌。若采用間歇滅菌的方法,就能殺滅物品中所有的微生物。具體做法是:將待滅菌的物品加熱至100℃,15~30分鐘,殺死其中的營(yíng)養(yǎng)體。然后冷卻,放入37℃恒溫箱中過(guò)夜,讓殘留的芽孢萌發(fā)成營(yíng)養(yǎng)體。第2天再重復(fù)上述步驟,三次左右,就可達(dá)到滅菌的目的。此法不需加壓滅菌鍋,適于推廣,但操作麻煩,所需時(shí)間長(zhǎng)。

d. 加壓蒸汽滅菌法:這是發(fā)酵工業(yè)、醫(yī)療保健、食品檢測(cè)和微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中最常用的一種滅菌方法。它適用于各種耐熱、體積大的培養(yǎng)基的滅菌,也適用于玻璃器皿、工作服等物品的滅菌。

加壓蒸汽滅菌是把待滅菌的物品放在一個(gè)可密閉的加壓蒸汽滅菌鍋中進(jìn)行的,以大量蒸汽使其中壓力升高。由于蒸汽壓的上升,水的沸點(diǎn)也隨之提高。在蒸汽壓達(dá)到1.055公斤/厘米2時(shí),加壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)的溫度可達(dá)到121℃。在這種情況下,微生物(包括芽孢)在15~20分鐘便會(huì)被殺死,而達(dá)到滅菌目的。如滅菌的對(duì)象是砂土、石蠟油等面積大、含菌多、傳熱差的物品,則應(yīng)適當(dāng)延長(zhǎng)滅菌時(shí)間。

在加壓蒸汽滅菌中,要引起注意的一個(gè)問(wèn)題是,在恒壓之前,一定要排盡滅菌鍋中的冷空氣,否則表上的蒸汽壓與蒸汽溫度之間不具對(duì)應(yīng)關(guān)系,這樣會(huì)大大降低滅菌效果。

 

3)影響滅菌的因素:

a.不同的微生物或同種微生物的不同菌齡對(duì)高溫的敏感性不同。多數(shù)微生物的營(yíng)養(yǎng)體和病毒在50~65℃,10分鐘就會(huì)被殺死;但各種孢子、特別是芽孢最能抗熱,其中抗熱性最強(qiáng)的是嗜熱脂肪芽孢桿菌,要在121℃,12分鐘才被殺死。對(duì)同種微生物來(lái)講,幼齡菌比老齡菌對(duì)熱更敏感。

b.微生物的數(shù)量多少顯然會(huì)影響滅菌的效果,數(shù)量越多,熱死時(shí)間越長(zhǎng)。

c.培養(yǎng)基的成分與組成也會(huì)影響滅菌效果。一般地講,蛋白質(zhì)、糖或脂肪存在,則提高抗熱性,pH在7附近,抗熱性最強(qiáng),偏向兩極,則抗熱能力下降,而不同的鹽類(lèi)可能對(duì)滅菌產(chǎn)生不同的影響;固體培養(yǎng)基要比液體培養(yǎng)基滅菌時(shí)間長(zhǎng)。

 

4)滅菌對(duì)培養(yǎng)基成分的影響:

a.pH值普遍下降。

b.產(chǎn)生混濁或沉淀,這主要是由于一些離子發(fā)生化學(xué)反應(yīng)而產(chǎn)生混濁或沉淀。例如Ca+2與PO4-3化合,就會(huì)產(chǎn)生磷酸鈣沉淀。

c.不少培養(yǎng)基顏色加深。

d.體積和濃度有所變化。

e.營(yíng)養(yǎng)成分有時(shí)受到破壞。

 

2、輻射

利用輻射進(jìn)行滅菌消毒,可以避免高溫滅菌或化學(xué)藥劑消毒的缺點(diǎn),所以應(yīng)用越來(lái)越廣,目前主要應(yīng)用在以下幾個(gè)方面:

1)接種室、手術(shù)室、食品、藥物包裝室常應(yīng)用紫外線殺菌。

2)應(yīng)用β射線作食品表面殺菌,γ射線用于食品內(nèi)部殺菌。經(jīng)輻射后的食品,因大量微生物被殺滅,再用冷凍保藏,可使保存期延長(zhǎng)。

 

3、過(guò)濾

采用機(jī)械方法,設(shè)計(jì)一種濾孔比細(xì)菌還小的篩子,做成各種過(guò)濾器。通過(guò)過(guò)濾,只讓液體培養(yǎng)基從篩子中流下,而把各種微生物菌體留在篩子上面,從而達(dá)到除菌的目的。這種滅菌方法適用于一些對(duì)熱不穩(wěn)定的體積小的液體培養(yǎng)基的滅菌以及氣體的滅菌。它的最大優(yōu)點(diǎn)是不破壞培養(yǎng)基中各種物質(zhì)的化學(xué)成分。但是比細(xì)菌還小的病毒仍然能留在液體培養(yǎng)基內(nèi),有時(shí)會(huì)給實(shí)驗(yàn)帶來(lái)一定的麻煩。

 

二、化學(xué)方法

一般化學(xué)藥劑無(wú)法殺死所有的微生物,而只能殺死其中的病原微生物,所以是起消毒劑的作用,而不是滅菌劑。

 

能迅速殺滅病原微生物的藥物,稱(chēng)為消毒劑。能抑制或阻止微生物生長(zhǎng)繁殖的藥物,稱(chēng)為防腐劑。但是一種化學(xué)藥物是殺菌還是抑菌,常不易嚴(yán)格區(qū)分。消毒劑在低濃度時(shí)也能殺菌(如1:1000硫柳汞)。由于消毒防腐劑沒(méi)有選擇性,因此對(duì)一切活細(xì)胞都有毒性,不僅能殺死或抑制病原微生物,而且對(duì)人體組織細(xì)胞也有損傷作用,所以只能用于體表、器械、排泄物和周?chē)h(huán)境的消毒。常用的化學(xué)消毒劑有:石碳酸、來(lái)蘇水(甲醛溶液)、氯化汞、碘酒、酒精等。 
編輯:songjiajie2010

 
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