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詳解丨生物安全實驗室的分級與設置

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2018-11-23
核心提示:根據(jù)實驗室操作的生物因子的危害等級不同,實驗室需要不同的防護水平。實驗室不同水平的設施、安全設備以及實驗操作技術(shù)和管理措
 根據(jù)實驗室操作的生物因子的危害等級不同,實驗室需要不同的防護水平。實驗室不同水平的設施、安全設備以及實驗操作技術(shù)和管理措施構(gòu)成了生物實驗室的各級生物安全水平。生物安全實驗室分為4個等級:一級生物安全實驗室(BSL-1)、二級生物安全實驗室|(BSL-2)、三級生物安全實驗室(BSL-3)和四級生物安全實驗室(BSL-4),俗稱分別為:P1、P2、P3和P4實驗室(P是“物理防護”的英文“physical protection"的首字母)。一級生物安全實驗室防護水平最低,四級生物安全實驗室防護水平最高。

 

一、一級生物安全實驗室

生物安全防護水平為一級的實驗室適用于操作在通常情況下不會引起人類或者動物疾病的微生物。一級生物安全實驗室的操作、安全設備和實驗設施的設計和建設僅適用于進行基礎的教學和研究,處理危害等級1的微生物。BSL-1是生物安全防護的基本水平,依靠標準的微生物操作來保證安全,缺少特殊的一級防護屏障或二級防護屏障。一般來說,一級生物安全實驗室僅能從事沒有感染性的操作,不能滿足食品微生物檢測實驗室的工作需要。

 

一級生物安全實驗室需滿足如下設施和設備的要求:實驗室的門應有可視窗并可鎖閉,門鎖及門的開啟方向應不妨礙室內(nèi)人員逃生。應設洗手池,宜設置在靠近實驗室的出口處:實驗室門口處應設存衣或掛衣裝置,可將個人服裝與實驗室工作服分開放置。實驗室的墻、天花板和地面應易清潔、不滲水、耐化學品和消毒滅菌劑的腐蝕。地面應平整、防滑,不應鋪設地毯。實驗室臺柜和座椅等應穩(wěn)固,邊角應圓滑。實驗室臺柜等和其擺放應便于清潔,實驗臺面應防水、耐腐蝕、耐熱和堅固。實驗室應有足夠的空間和臺柜等擺放實驗室設備和物品。應根據(jù)工作性質(zhì)和流程合理,放實驗室設備、臺柜、物品等,避免相互干擾、交叉污染,并應不妨礙逃生和急救。實驗室可以利用自然通風。如果采用機械通風,應避免交叉污染。如果有可開啟的窗戶,應安裝可防蚊蟲的紗窗。實驗室內(nèi)應避免不必要的反光和強光。若操作刺激或腐蝕性物質(zhì),應在30 m內(nèi)設洗眼裝置,必要時應設緊急噴淋裝置。若操做有毒、刺激性、放射性揮發(fā)物質(zhì),應在風險評估的基礎上,配備適當?shù)呢搲号棚L柜。若使用高毒性、放射性等物質(zhì),應配備相應的安全設施、設備和個體防護裝備,應符合國家、地方的相關(guān)規(guī)定和要求。若使用高壓氣體和可燃氣體,應有安全措施,應符合國家、地方的相應規(guī)定和要求。應設應急照明裝置。應有足夠的電力供應。應有足夠的固定電源插座,避免多臺設備使用共同的電源插座。應有可靠的接地系統(tǒng),應在關(guān)鍵節(jié)點安裝漏電保護裝置或監(jiān)測報警裝置。供水和排水管道系統(tǒng)應不滲漏,下水應有防回流設計。應配備適用的應急器材,如消防器材、意外事故處理器材、急救器材等。應配備適用的通訊設備。必要時,應配適當?shù)南緶缇O備。

 

二、二級生物安全實驗室

生物安全防護水平為二級的實驗室適用于操作能夠引起人類或者動物疾病,但一般情況下對人、動物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴重危害,傳播風險有限,實驗室感染后很少引起嚴重疾病,并且具備有效治療和預防措施的微生物。二級生物安全實驗室的操作、安全設備和實驗設施的設計和建設適用于臨床、診斷、教學,處理危害等級II的微生物。


BSL-2實驗室的危險主要是意外的經(jīng)皮膚或黏膜接觸或攝入生物危險物質(zhì),需使用生物安全柜進行防護。BSL-2實驗室有比較齊全的一級屏障,例如個人防護裝備,也有廢棄物消毒設施等二級屏障來保正安全。對于廣大食品微生物檢測實驗室,一般都要開展沙門氏菌、金黃色葡萄球菌等危害等級II的致病微生物的檢測工作,需要達到二級生物安全實驗室的防護水平。

 

二級生物安全實驗室的設施和設備要求除要達到一級生物安全實驗室的要求外,還要滿足:實驗室主入口的門、放置生物安全柜實驗間的門應可自動關(guān)閉;實驗室主入口的門應有進入控制措施。實驗室工作區(qū)域外應有存放備用物品的條件。應在實驗室工作區(qū)配備洗眼裝置。應在實驗室或其所在的建筑內(nèi)配備高壓蒸汽滅菌器或其他適當?shù)南緶缇O備,所配備的消毒滅菌設備應以風險評估為依據(jù)。應在操作病原微生物樣本的實驗間內(nèi)配備生物安全柜。應按產(chǎn)品的設計要求安裝和使用生物安全柜。如果生物安全柜的排風在室內(nèi)循環(huán),室內(nèi)應具備通風換氣的條件;如果使用需要管道排風的生物安全柜,應通過獨立于建筑物其他公共供通風系統(tǒng)的管道排出。應有可靠的電力供應。必要時,重要設備(如:培養(yǎng)箱、生物安全柜、冰箱等)應配置備用電源。

 

三、三級生物安全實驗室

生物安全防護水平為三級的實驗室適用于操作能夠引起人類或者動物嚴重疾病,比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物。三級生物安全實驗室的操作、安全設備和實驗設施的設計和建設適用于專門的診斷和研究,處理危害等級III的微生物。BSL-3實驗室的危險主要是經(jīng)皮膚破損處、經(jīng)口攝入以及吸入感染性氣溶膠。BSL-3實驗室通過一級和二級防護屏障來保護實驗操作人員和實驗室周圍免受污染。它的二級屏障包括受控的進入通道和經(jīng)高效過濾器過濾的通風設施。

 

三級生物安全實驗室的設施和設備要求很嚴格,具體如下。

1.平面布局

實驗室應明確區(qū)分輔助工作區(qū)和防護區(qū),應在建筑物中自成隔離區(qū)或為獨立建筑物,應有出入控制。防護區(qū)中直接從事高風險操作的工作間為核心工作間,人員應通過緩沖間進人核心工作間。適用于操作危害等級I的微生物的實驗室輔助工作區(qū)應至少包括監(jiān)控室和清潔衣物更換間;防護區(qū)應至少包括緩沖間(可兼作脫防護服間)及核心工作間。適用于操作危害等級II的微生物的實驗室輔助工作區(qū)應至少包括監(jiān)控室、清潔衣物更換間和淋浴間;防護區(qū)應至少包括防護服更換間、緩沖間及核心工作間。適用于操作危害等級II的微生物的實驗室核心工作間不宜直接與其他公共區(qū)域相鄰。如果安裝傳遞窗,其結(jié)構(gòu)承壓力及密閉性應 符合所在區(qū)域的要求,并具備對傳遞窗內(nèi)物品進行消毒滅菌的條件。必要時,應設置具備送排風或自凈化功能的傳遞窗,排風應經(jīng)高效過濾器(high efficiency particulate air filter, HEPA) 過濾后排出。

 

2.圍護結(jié)構(gòu)

圍護結(jié)構(gòu)(包括墻體)應符合國家對該類建筑的抗震要求和防火要求。天花板、地板、墻間的交角應易清潔和消毒滅菌。實驗室防護區(qū)內(nèi)圍護結(jié)構(gòu)的所有縫隙和貫穿處的接縫都應可靠密封。實驗室防護區(qū)內(nèi)圍護結(jié)構(gòu)的內(nèi)表面應光滑、耐腐蝕、防水,以易于清潔和消毒滅菌。實驗室防護區(qū)內(nèi)的地面應防滲漏、完整、光潔、防滑、耐腐蝕、不起塵。實驗室內(nèi)所有的門應可自動關(guān)閉,需要時,應設觀察窗;門的開啟方向不應妨礙逃生。實驗室內(nèi)所有窗戶應為密閉窗,玻璃應耐撞擊、防破碎。實驗室及設備間的高度應滿足設備的安裝要求,應有維修和清潔空間。在通風空調(diào)系統(tǒng)正常運行狀態(tài)下,采用煙霧測試等目視方法檢查實驗室防護區(qū)內(nèi)圍護結(jié)構(gòu)的嚴密性時,所有縫隙應無可見泄漏。

 

3.通風空調(diào)系統(tǒng)

應安裝獨立的實驗室送排風系統(tǒng),應確保在實驗室運行時氣流由低風險區(qū)向高風險區(qū)流動,同時確保實驗室空氣只能通過HEPA過濾器過濾后經(jīng)專用的排風管道排出。實驗室防護區(qū)房間內(nèi)送風口和排風口的布置應符合定向氣流的原則,利于減少房間內(nèi)的渦流和氣流死角;送排風應不影響其他設備(如: 11級生物安全柜)的正常功能。不得循環(huán)使用實驗室防護區(qū)排出的空氣。應按產(chǎn)品的設計要求安裝生物安全柜和其排風管道,可以將生物安全柜排出的空氣排入實驗室的排風管道系統(tǒng)。實驗室的送風應經(jīng)過HEPA過濾器過濾,宜同時安裝初效和中效過濾器。實驗室的外部排風口應設置在主導風的下風向(相對于送風口),與送風口的直線距離應大于12m,應至少高出本實驗室所在建筑的頂部2m,應有防風、防雨、防鼠、防蟲設計,但不應影響氣體向上空排放。HEPA過濾器的安裝位置應盡可能靠近送風管道在實驗室內(nèi)的送風口端和排風管道在實驗室內(nèi)的排風口端。應可以在原位對排風HEPA過濾器進行消毒滅菌和檢漏。如在實驗室防護區(qū)外使用高效過濾器單元,其結(jié)構(gòu)應牢固,應能承受2500 Pa的壓力;高效過濾器單元的整體密封性應達到在關(guān)閉所有通路并維持腔室內(nèi)的溫度在設計范圍上限的條件下,若使空氣壓力維持在1000 Pa時,腔室內(nèi)每分鐘泄漏的空氣量應不超過腔室凈容積的0.1%。應在實驗室防護區(qū)送風和排風管道的關(guān)鍵節(jié)點安裝生物型密閉閥,必要時,可完全關(guān)閉。應在實驗室送風和排風總管道的關(guān)鍵節(jié)點安裝生物型密閉閥,必要時,可完全關(guān)閉。生物型密閉閥與實驗室防護區(qū)相通的送風管道和排風管道應牢固、易消毒滅菌、耐腐蝕、抗老化,宜使用不銹鋼管道;管道的密封性應達到在關(guān)閉所有通路并維持管道內(nèi)的溫度在設計范圍上限的條件下,若使空氣壓力維持在500 Pa時,管道內(nèi)每分鐘泄漏的空氣量應不超過管道內(nèi)凈容積的0.2%,應有備用排風機。應盡可能減少排風機后排風管道正壓段的長度,該段管道不應穿過其他房間。不應在實驗室防護區(qū)內(nèi)安裝分體空調(diào)。

 

4.供水與供氣系統(tǒng)

應在實驗室防護區(qū)內(nèi)的實驗間的靠近出口處設置非手動洗手設施;如果實驗室不具備供水條件,則應設非手動手消毒滅菌裝置。應在實驗室的給水與市政給水系統(tǒng)之間設防回流裝置。進出實驗室的液體和氣體管道系統(tǒng)應牢固、不滲漏、防銹、耐壓、耐溫(冷或熱)、耐腐蝕。應有足夠的空間清潔、維護和維修實驗室內(nèi)暴露的管道,應在關(guān)鍵節(jié)點安裝截止閥、防回流裝置或HEPA過濾器等。如果有供氣(液)罐等,應放在實驗室防護區(qū)外易更換和維護的位置,安裝牢固,不應將不相容的氣體或液體放在一起。如果有真空裝置,應有防止真空裝置的內(nèi)部被污染的措施;不應將真空裝置安裝在實驗場所之外。

 

5.污物處理及消毒滅菌系統(tǒng)

應在實驗室防護區(qū)內(nèi)設置生物安全型高壓蒸汽滅菌器。宜安裝專用的雙扉高壓滅菌器,其主體應安裝在易維護的位置,與圍護結(jié)構(gòu)的連接之處應可靠密封。對實驗室防護區(qū)內(nèi)不能高壓滅菌的物品應有其他消毒滅菌措施。高壓蒸汽滅菌器的安裝位置不應影響生物安全柜等安全隔離裝置的氣流。如果設置傳遞物品的渡槽,應使用強度符合要求的耐腐蝕性材料,并方便更換消毒滅菌液。淋浴間或緩沖間的地面液體收集系統(tǒng)應有防液體回流的裝置。實驗室

防護區(qū)內(nèi)如果有下水系統(tǒng),應與建筑物的下水系統(tǒng)完全隔離;下水應直接通向本實驗室專用的消毒滅菌系統(tǒng)。所有下水管道應有足夠的傾斜度和排量,確保管道內(nèi)不存水;管道的關(guān)鍵節(jié)點應按需要安裝防回流裝置、存水彎(深度應適用于空氣壓差的變化)或密閉閥門等;


下水系統(tǒng)應符合相應的耐壓、耐熱、耐化學腐蝕的要求,安裝牢固,無泄漏,便于維護、清潔和檢查。應使用可靠的方式處理處置污水(包括污物),并應對消毒滅菌效果進行監(jiān)測,以確保達到排放要求。應在風險評估的基礎上,適當處理實驗室輔助區(qū)的污水,并應監(jiān)測,以確保排放到市政管網(wǎng)之前達到排放要求。可以在實驗室內(nèi)安裝紫外線消毒燈或其他適用的消毒滅菌裝置。應具備對實驗室防護區(qū)及與其直接相通的管道進行消毒滅菌的條件。應具備對實驗室設備和安全隔離裝置(包括與其直接相通的管道)進行消毒滅菌的條件。應在實驗室防護區(qū)內(nèi)的關(guān)鍵部位配備便攜的局部消毒滅菌裝置(如:消毒噴霧器等),并備有足夠的適用消毒滅菌劑。

 

6.電力供應系統(tǒng)

電力供應應滿足實驗室的所有用電要求,并應有冗余。生物安全柜、送風機和排風機、照明、自控系統(tǒng)、監(jiān)視和報警系統(tǒng)等應配備不間斷備用電源,電力供應應至少維持30 min,應在安全的位置設置專用配電箱。

 

7.照明系統(tǒng)

實驗室核心工作間的照度應不低于350 k,其他區(qū)域的照度應不低于200 1x,宜采用吸頂式防水潔凈照明燈。應避免過強的光線和光反射。應設不少于30 min的應急照明系統(tǒng)。

 

8.自控、監(jiān)視與報警系統(tǒng)

進入實驗室的門應有門禁系統(tǒng),應保證只有獲得授權(quán)的人員才能進入實驗室。需要時,應可立即解除實驗室門的互鎖;應在互鎖門的附近設置緊急手動解除互鎖開關(guān)。核心工作間的緩沖間的入口處應有指示核心工作間工作狀態(tài)的裝置(如:文字顯示或指示燈),必要時,應同時設置限制進入核心工作間的連鎖機制。啟動實驗室通風系統(tǒng)時,應先啟動實驗室排風,后啟動實驗室送風;關(guān)停時,應先關(guān)閉生物安全柜等安全隔離裝置和排風支管密閉閥,再關(guān)實驗室送風及密閉閥,后關(guān)實驗室排風及密閉閥。當排風系統(tǒng)出現(xiàn)故障時,應有機制避免實驗室出現(xiàn)正壓和影響定向氣流。當送風系統(tǒng)出現(xiàn)故障時,應有機制避免實驗室內(nèi)負壓影響實驗室人員的安全、影響生物安全柜等安全隔離裝置的正常功能和圍護結(jié)構(gòu)的完整性。應通過對可能造成實驗室壓力波動的設備和裝置實行連鎖控制等措施,確保生物安全柜、負壓排風柜(罩)等局部排風設備與實驗室送排風系統(tǒng)之間的壓力關(guān)系和必要的穩(wěn)定性,并應在啟動、運行和關(guān)停過程中保持有序的壓力梯度。應設裝置連續(xù)監(jiān)測送排風系統(tǒng)HEPA過濾器的阻力,需要時,及時更換HEPA過濾器。應在有負壓控制要求的房間入口的顯著位置,安裝顯示房間負壓狀況的壓力顯示裝置和控制區(qū)間提示。中央控制系統(tǒng)應可以實時監(jiān)控、記錄和存儲實驗室防護區(qū)內(nèi)有控制要求的參數(shù)、關(guān)鍵設施設備的運行狀態(tài);應能監(jiān)控、記錄和存儲故障的現(xiàn)象、發(fā)生時間和持續(xù)時間;應可以隨時查看歷史記錄。中央控制系統(tǒng)的信號采集間隔時間應不超過1 min,各參數(shù)應易于區(qū)外和識別。中央控制系統(tǒng)應能對所有故障和控制指標進行報警,報警應區(qū)分一般報警和緊急報警。緊急報警應為聲光同時報警,應可以向?qū)嶒炇覂?nèi)外人員同時發(fā)出緊急警報;應在實驗室核心工作間內(nèi)設置緊急報警按鈕。應在實驗室的關(guān)鍵部位設置監(jiān)視器,需要時,可實時監(jiān)視并錄制實驗室活動情況和實驗室周圍情況。監(jiān)視設備應有足夠的分辨率,影像存儲介質(zhì)應有足夠的數(shù)據(jù)存儲容量。

 

9.實驗室通訊系統(tǒng)

實驗室防護區(qū)內(nèi)應設置向外部傳輸資料和數(shù)據(jù)的傳真機或其他電子設備。監(jiān)控室和實驗室內(nèi)應安裝語音通訊系統(tǒng)。如果安裝對講系統(tǒng),宜采用向內(nèi)通話受控、向外通話非受控的選擇性通話方式。通訊系統(tǒng)的復雜性應與實驗室的規(guī)模和復雜程度相適應。

 

10.參數(shù)要求

實驗室的圍護結(jié)構(gòu)應能承受送風機或排風機異常時導致的空氣壓力載荷。適用于操作危害等級I的微生物的實驗室核心工作間的氣壓(負壓)與室外大氣壓的壓差值應不小于30Pa,與相鄰區(qū)域的壓差(負壓)應不小于10 Pa;適用于操作危害等級II的微生物的實驗室的核心工作間的氣壓(負壓)與室外大氣壓的壓差值應不小于40 Pa,與相鄰區(qū)域的壓差(負壓)應不小于15 Pa.實驗室防護區(qū)各房間的最小換氣次數(shù)應不小于12次/h,實驗室溫度宜控制在18℃-26℃范圍內(nèi)。正常情況下,實驗室的相對濕度宜控制在30%~70%范圍內(nèi);消毒狀態(tài)下,實驗室的相對濕度應能滿足消毒滅菌的技術(shù)要求。在安全柜開啟情況下,核心工作間的噪聲應不大于68 dB (A).實驗室防護區(qū)的靜態(tài)潔凈度應不低于8級水平。

 

四、四級生物安全實驗室

生物安全防護水平為四級的實驗室適用于操作能夠引起人類或者動物非常嚴重疾病的微生物,以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。四級生物安全實驗室的操作、安全設備和實驗設施的設計和建設適用于進行非常危險的外源性生物因子或未知的高度危險的致病因子的操作,操作對象通常是危害等級IV或那些未知的且與危害等級IV的微生物具有相似特點的微生物。BSL-4實驗室的危險主要通過黏膜或破損皮膚,通過呼吸道吸入感染性氣溶膠。實驗室人員通過III級生物安全柜或II級生物安全柜加正壓服與感染性氣溶膠完全隔離,并且BSL-4實驗室有復雜的特殊通風裝置和廢棄物處理系統(tǒng)。

 

四級生物安全實驗室的設施和設備要求除要達到三級生物安全實驗室的要求外,還要滿足:


①實驗室應建造在獨立的建筑物內(nèi)或建筑物中獨立的隔離區(qū)域內(nèi)。

應有嚴格限制進入實驗室的門禁措施,應記錄進入人員的個人資料、進出時間、授權(quán)活動區(qū)域等信息;


②對與實驗室運行相關(guān)的關(guān)鍵區(qū)域也應有嚴格和可靠的安保措施,避免非授權(quán)進入。


③實驗室的輔助工作區(qū)應至少包括監(jiān)控室和清潔衣物更換間。


④適用于操作危害等級II的微生物的實驗室防護區(qū)應到至少包括防護走廊、內(nèi)防護服更換間、淋浴間、外防護服更換間和核心工作間,外防護服更換間應為氣鎖。適用于操作危害等級IV的實驗室的防護區(qū)應包括防護走廊、內(nèi)防護服更換間、淋浴間、外防護服更換間、化學淋浴間和核心工作間,化學淋浴間應為氣鎖,具備對專用防護服或傳遞物品的表面進行清潔和消毒滅菌的條件,具備使用生命支持供氣系統(tǒng)的條件。

實驗室防護區(qū)的圍護結(jié)構(gòu)應盡量遠離建筑外墻;

實驗室的核心工作間應盡可能設置在防護區(qū)的中部。應在實驗室的核心工作間內(nèi)配備生物安全型高壓滅菌器;如果配備雙扉高壓滅菌器,其主體所在房間的室內(nèi)氣壓應為負壓,并應設在實驗室防護區(qū)內(nèi)易更換和維護的位置。


⑤如果安裝傳遞窗,其結(jié)構(gòu)承壓力及密閉性應符合所在區(qū)域的要求;需要時,應配備符合氣鎖要求的并具備消毒滅菌條件的傳遞窗。

實驗室防護區(qū)圍護結(jié)構(gòu)的氣密性應達到在關(guān)閉受測房間所有通路并維持房間內(nèi)的溫度在設計范圍上限的條件下,當房間內(nèi)的空氣壓力上升到500 Pa后,20min內(nèi)自然衰減的氣壓小于250Pa。


⑥利用具有生命支持系統(tǒng)的正壓服操作常規(guī)量經(jīng)空氣傳播致病微生物因子的實驗室應同時配備緊急支援氣罐,緊急支援氣罐的供氣時間應不少于60 min/人。生命支持供氣系統(tǒng)應有自動啟動的不間斷備用電源供應,供電時間應不少于60min。供呼吸使用的氣體的壓力、流量、含氧量、溫度、濕度、有害物質(zhì)的含量等應符合職業(yè)安全的要求。生命支持系統(tǒng)應具備必要的報警裝置。實驗室防護區(qū)內(nèi)所有區(qū)域的室內(nèi)氣壓應為負壓,實驗室核心工作間的氣壓(負壓)與室外大氣壓的壓差值應不小于60 Pa, 與相鄰區(qū)域的壓差(負壓)應不小于25 Pa,適用于操作危害等級II的微生物的實驗室,應在III級生物安全柜或相應的安全隔離裝置內(nèi)操作致病性生物因子;同時具備與安全隔離裝置配套的物品傳遞設備以及生物安全型高壓蒸汽滅菌器。

 

⑦實驗室的排風應經(jīng)過兩級HEPA過濾器處理后排放。應可以在原位對送風HEPA過濾器進行消毒滅菌和檢漏。實驗室防護區(qū)內(nèi)所有需要運出實驗室的物品或其包裝的表面應經(jīng)過消毒滅菌;瘜W淋浴消毒滅菌裝置應在無電力供應的情況下仍可以使用,消毒滅菌劑儲存器的容量應滿足所有情況下對消毒滅菌劑使用量的需求。

 

另外需要注意的是,生物安全實驗室分級依據(jù)的“生物因子危害等級”不僅指微生物的危害程度,還包括對生物因子的操作內(nèi)容的危害程度。比如:大腸埃希氏菌0157: H7屬危害等級II的致病微生物,但是如果不涉及培養(yǎng)、分離等感染性的操作,僅對它進行核酸擴增方面的操作,那么就可以在一級生物安全實驗室內(nèi)進行操作。

編輯:songjiajie2010

 
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