微生物的致病性是影響生物危害評估最重要的決定性因素。感染性微生物的危險(xiǎn)度等級分類為實(shí)驗(yàn)室生物危害評估和確立對待定病原體的生物安全防護(hù)水平奠定了基礎(chǔ)。一般地,危害度等級高的微生物需要的生物安全防護(hù)水平較高。但是,即便是對于同一種微生物,不同的實(shí)驗(yàn)操作可能產(chǎn)生的潛在危害是不同的。所以在確定適當(dāng)?shù)纳锇踩綍r(shí),除考慮病原體的危害度等級以外,還應(yīng)考慮其他因素。例如,歸入危險(xiǎn)度二級的微生物,進(jìn)行操作處理時(shí)通常需要在BSL-2條件下進(jìn)行。然而,如果特定實(shí)驗(yàn)可能產(chǎn)生高濃度的氣溶膠時(shí),在BSL-3條件下進(jìn)行操作則更為恰當(dāng)。又如,危害度二級的高只病性禽流感病毒和艾滋病病毒培養(yǎng)時(shí)要求在BSL-3防護(hù)水平實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行操作,而對于未經(jīng)培養(yǎng)的感染性材料則僅要求在BSL-2防護(hù)水平實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行操作。
生物危害評估也可能在相關(guān)信息不足的情況下進(jìn)行,這時(shí)按照WHO《實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊》第三版中的要求應(yīng)謹(jǐn)慎地采取一些較為保守的標(biāo)本處理方法。
1)只要采自病原體的標(biāo)本,均應(yīng)當(dāng)遵循標(biāo)準(zhǔn)防護(hù)方法,并采用隔離的防護(hù)措施;
2)處理此類標(biāo)本時(shí)最低需要二級生物安全水平;
3)標(biāo)本的運(yùn)送應(yīng)當(dāng)遵循國家和/或國際的相關(guān)規(guī)定。
生物危害評估不僅有助于確立實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化操作程序,有助于實(shí)驗(yàn)室的合理設(shè)計(jì)與布局,有助于實(shí)驗(yàn)設(shè)備和安全設(shè)備的正確配置與有效使用,而且有助于在工作過程中對于標(biāo)準(zhǔn)操作程序以及實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、設(shè)施的配備是否恰當(dāng)和使用的有效性進(jìn)行評價(jià)與改進(jìn)。所以,生物危害評估活動應(yīng)是一個動態(tài)的、不斷完善的過程。
加強(qiáng)安全體系建設(shè) 遠(yuǎn)離獲得性感染
實(shí)驗(yàn)室獲得性感染是指通過實(shí)驗(yàn)工作等活動導(dǎo)致的工作人員及相關(guān)人員的感染,其中大約2/3的實(shí)驗(yàn)室獲得性感染與在工作中直接接觸、使用含有傳染性病原體的標(biāo)本或生物材料等有關(guān)。最常見的實(shí)驗(yàn)室獲得性感染由上呼吸道吸入,經(jīng)口食入尖銳物品刺傷接種及皮膚黏膜污染等形式的職業(yè)暴露所致。PIKE對3921例報(bào)告的實(shí)驗(yàn)室感染分析表明,其中59%源自研究性實(shí)驗(yàn)室,17%發(fā)生在臨床診斷性實(shí)驗(yàn)室。大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室感染由細(xì)菌、病毒和立克次體引起。在這些實(shí)驗(yàn)室感染中氣溶膠是最主要的傳播途徑,在實(shí)驗(yàn)室以外引起的感染中70%是由噴濺、針刺或切割傷所致。
由于人類免疫缺陷病毒、丙型肝炎病毒、特別是由于SARS 冠狀病毒等不時(shí)引起實(shí)驗(yàn)室感染的發(fā)生,人們重新認(rèn)識到臨床實(shí)驗(yàn)室工作人員可能由于職業(yè)原因暴露于引起疾病、甚至是致命疾病的病原微生物。這種通過實(shí)驗(yàn)室職業(yè)暴露獲得的感染性疾病稱作實(shí)驗(yàn)室獲得性感染。實(shí)驗(yàn)室工作人員由于長期處在具有一定生物危險(xiǎn)的環(huán)境中,同時(shí)由于實(shí)驗(yàn)室獲得性感染并不總發(fā)生,漸漸地疏忽于對實(shí)驗(yàn)室的生物安全管理,甚至放縱自己的行為而不能完全遵守相應(yīng)的安全操作規(guī)范。這就需要我們對實(shí)驗(yàn)室生物安全管理進(jìn)行強(qiáng)化,通過加強(qiáng)生物安全管理并在工作過程中遵照經(jīng)長期實(shí)踐而逐步建立的安全操作規(guī)范進(jìn)行預(yù)防實(shí)驗(yàn)室獲得性感染;通過實(shí)驗(yàn)室生物安全體系建設(shè),制定并執(zhí)行相應(yīng)生物安全水平的防護(hù)措施,繼續(xù)教育、培訓(xùn)和督促實(shí)驗(yàn)室工作人員規(guī)范自己的行為,從而把實(shí)驗(yàn)室生物安全風(fēng)險(xiǎn)降低到最低程度。
(1)實(shí)驗(yàn)室由于其規(guī)模、建筑布局、周圍環(huán)境、內(nèi)部分割及通風(fēng)條件等的不同而有不同的室內(nèi)小氣候。室內(nèi)小氣候的好壞、優(yōu)劣,對實(shí)驗(yàn)室工作人員的身體健康有很大的影響。實(shí)驗(yàn)室也由于處理和檢測的標(biāo)本不同、檢測目的和方法不同,其藏匿的具有潛在感染能力的微生物的種類、數(shù)量和存在形式亦不同。不同于研究型實(shí)驗(yàn)室、臨床實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)本中或生物材料中可能攜帶的潛在病原微生物往往是未知而多樣的。
(2)實(shí)驗(yàn)室在工作過程中可能造成實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的污染,如離心、混勻、接種、制片、移液、加樣等可產(chǎn)生氣溶膠污染,標(biāo)本噴濺等可直接污染皮膚黏膜及實(shí)驗(yàn)臺面和地面等。另外,由于室內(nèi)環(huán)境空間的限制,設(shè)備、人員擁擠以及通風(fēng)換氣不充分等都可能使實(shí)驗(yàn)室內(nèi)病原體的濃度增加,使人群在室內(nèi)被污染的機(jī)會明顯大于室外。另外,嚙齒動物、昆蟲等也都可攜帶傳播微生物病原體,給實(shí)驗(yàn)室工作人員健康帶來威脅。
由于實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)本來自不同的患者,其傳染性和只病性也是未知的,同時(shí),實(shí)驗(yàn)室生物安全體系建設(shè)的不平衡,所以實(shí)驗(yàn)室安全水平的正確劃分和恰當(dāng)應(yīng)用也比較困難。生物安全問題往往是因?yàn)橐恍┘?xì)節(jié)疏忽而導(dǎo)致的,所以建立完善的實(shí)驗(yàn)室生物安全管理規(guī)章制度、生物安全操作規(guī)程,并在實(shí)際工作中采取措施嚴(yán)保執(zhí)行,加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室工作人員的培訓(xùn)、同時(shí)關(guān)注實(shí)驗(yàn)室工作人員的身體健康、制定實(shí)驗(yàn)室發(fā)生獲得性感染時(shí)的應(yīng)急預(yù)案勢在必行。
實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)的四道防線
根據(jù)使用的一級和二級的防護(hù)屏障的不同,實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)水平分為四級,防護(hù)水平由低到高排列即:一級生物安全水平(BSL-1)、二級生物安全水平(BSL-2)、三級生物安全水平(BSL-3)和四級生物安全水平(BSL-4)。所謂一級防護(hù)屏障是指生物安全柜和個人防護(hù)裝備等構(gòu)成的防護(hù)屏障,二級防護(hù)屏障則是指實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施結(jié)構(gòu)和通風(fēng)系統(tǒng)等構(gòu)成的防護(hù)屏障。不同級別的生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室都是基于確保處理特定傳染病原體時(shí)的工作人員和環(huán)境的安全而進(jìn)行設(shè)計(jì)的。
BSL-1:一級生物安全水平
BSL-1是圍護(hù)屏障水平和生物安全級別最低的生物實(shí)驗(yàn)室,在該級別實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行的操作都是在室內(nèi)開放空間進(jìn)行的,所以,在其中活動所涉及的生物因子應(yīng)是已知不引起健康成人感染的微生物。但是,應(yīng)注意這些微生物也許有可能引起幼兒、老人或免疫患者的機(jī)會感染。
BSL-2:二級生物安全水平
BSL-2主要用于處理中度危險(xiǎn)的病原體,如沙門氏菌屬和乙型肝炎病毒等。這些病原體可能通過意外的經(jīng)口攝入或經(jīng)皮膚、黏膜暴露而感染。在遵守標(biāo)準(zhǔn)操作程序的情況下,這些病原體的處理可在開放實(shí)驗(yàn)臺進(jìn)行。但是,如預(yù)期有發(fā)生噴濺或可產(chǎn)生氣溶膠時(shí)應(yīng)使用生物安全柜等。
BSL-3:三級生物安全水平
BSL-3是為應(yīng)對主要通過氣溶膠傳播的病原微生物如結(jié)核分支桿菌等的實(shí)驗(yàn)室操作而設(shè)計(jì)的。BSL-3有嚴(yán)格的操作規(guī)程和程序,使用一級和二級防護(hù)屏障,同時(shí)對于諸如通風(fēng)系統(tǒng)都有特殊的要求。
BSL-4:四級生物安全水平
BSL-4用于可引起致命疾病的病原體的處理和實(shí)驗(yàn)操作,這些病原體可能通過氣溶膠傳播的或者沒有有效的疫苗預(yù)防或沒有有效的治療方法。BSL-4實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)操作一般地應(yīng)在三級生物安全柜內(nèi)進(jìn)行,或由身著正壓防護(hù)服的工作人員進(jìn)行操作處理。BSL-4實(shí)驗(yàn)室應(yīng)是完全獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)室,其通風(fēng)系統(tǒng)和廢物處理亦應(yīng)完全獨(dú)立。