在可食的植物中,有許多蔬菜、水果含有果膠,果膠也是一種高分子化合物,化學(xué)組成如半乳糖醛酸。果膠水解后,產(chǎn)生果膠酸和果酸,果膠有一個(gè)重要的特性就是膠凝(凝凍)。測(cè)定方法有3種:重量法 、比色法 、容量法。
(一)重量法
1.原理:利用果膠酸鈣不溶于水的特性,先使果膠質(zhì)從樣品中提取出來,再加沉淀劑使果膠酸鈣沉淀,測(cè)定重量并換算成果膠質(zhì)重量。沉淀劑+果膠→果膠酸鈣
采用的沉淀劑有兩種:
電介質(zhì): Nacl Cacl2;
有機(jī)溶液:甲醇 乙醇 丙酮.
對(duì)于聚半乳糖醛酸酯化程度為20%時(shí),水溶性差,易沉淀的果膠酸用Nacl為沉淀劑
對(duì)于聚半乳糖醛酸酯化程度為50%時(shí),水溶性大,難沉淀的果膠酸用Cacl2為沉淀劑
對(duì)于聚半乳糖醛酸酯化程度為100%時(shí),用有機(jī)溶劑為沉淀劑
這說明了聚半乳糖醛酸酯化程度大、水溶性就大,脂化程度會(huì)高,酒精濃度也應(yīng)會(huì)大。
2.方法:
稱30-50g(干樣5-10g)于250ml燒杯→加150ml水→煮沸1h(攪拌加水解免損失)→冷卻→定溶→250ml→抽濾→吸濾液25ml→于500ml燒杯→加0.1N NaOH 100ml→放30min→加50ml 1N 醋酸→加50ml 2N Cacl2→放1hr→沸騰5min后→用烘至恒重的濾紙過濾→用熱水洗至無Cl-→把濾紙+殘?jiān)诤娓珊阒氐姆Q量瓶內(nèi)→105℃烘至恒重
3.計(jì)算:
果膠質(zhì)%=(0.9235×G)/( W×25/250) ×100
0.9235:果膠酸鈣換算成果膠質(zhì)的等數(shù)
G:濾渣重量,g
W:樣品重量,g
(二)容量法(蒸餾滴定法)
1.原理
溶解于水的果膠質(zhì)是由多縮阿拉伯糖和果膠酸鈣組成的測(cè)出果膠質(zhì)的特征部分阿拉伯糖,則可算出果膠質(zhì)含量。
溴混合液在Hcl作用下放出溴,溴再與糠醛作用,剩余的溴與碘化鉀作用析出碘,可用亞硫酸鈉滴定,從而計(jì)算糠醛的量。
2.步驟
稱搗碎樣10g→于250ml燒瓶中→加12% HCl 100ml(比重1.06)→接冷凝管并在瓶上接一個(gè)分液漏斗→于140-150℃水浴加熱蒸餾液取于量筒→餾液達(dá)30ml時(shí)→從漏斗加12% Hcl 30ml于燒瓶→繼續(xù)蒸餾→保持瓶內(nèi)體積→至餾出液無糠醛(可取餾液1d于濾紙上,旁邊滴醋酸苯胺試液1d,有糠醛存在時(shí)呈紅色)
在餾液中加12% Hcl使總體積為300ml→取出100ml→加25ml 溴混合液→暗處放1hr→再加15% 碘化鉀10ml→淀粉指示劑1d→用0.1N 硫代硫酸鈉滴定
3.計(jì)算
果膠質(zhì)=(N(V2-V1)×0.024×3.7)/W × 100
0.024:1N溴溶液1ml相當(dāng)于糠醛的量,g
3.7:在普通蒸餾條件下,將糠醛換稱為果膠質(zhì)的等數(shù)
W:樣品溶液相當(dāng)于樣品的量,g
N:硫代硫酸鈉標(biāo)液的當(dāng)量濃度
V1:空白滴定硫代硫酸鈉標(biāo)液消耗的體積,ml
V2:樣液硫代硫酸鈉標(biāo)液消耗的體積,ml
(三)比色法
方法基于果膠物質(zhì)水解,生成物半乳糖醛酸在強(qiáng)酸中與咔唑的縮合反應(yīng),然后對(duì)其紫紅色溶液進(jìn)行比色定量測(cè)定。生成紫紅色物質(zhì)與半乳糖醛酸濃度成正比
操作:
a.副作半乳糖醛酸標(biāo)準(zhǔn)曲線
b.提取樣品中果膠物質(zhì),定容100ml
c.測(cè)定吸光度,查曲線得半乳糖醛酸含量
果膠質(zhì)總量%=(半乳糖醛酸(μg/ml)×100)/(樣品克數(shù)×10/200×10000)