乳粉中添加尿苷酸(UMP)、胞苷酸(CMP)、腺苷酸(AMP)、鳥苷酸(GMP)、肌苷酸(IMP)等多種核苷酸,用來提高嬰兒的免疫調(diào)節(jié)功能和記憶力。
核苷酸分析目前存在的挑戰(zhàn):
由于核苷酸極性很大,用反相色譜柱很難達(dá)到很好的保留和分離,所以為了提高核苷酸的保留往往會(huì)嘗試離子對色譜方法,離子對色譜方法存在以下問題:
1.容易起泡,管路中有氣泡,影響分析
2.平衡時(shí)間長,延長了分析工作時(shí)間
3.難以清洗,對色譜柱有損傷
4.易變質(zhì),容易堵塞管路,損傷儀器
沃特世公司(Waters®)解決方案:
1.避免使用離子對試劑,僅需要使用揮發(fā)性乙酸銨、乙腈體系
2.建議使用Oasis® HLB SPE 小柱利用通過凈化方式進(jìn)行乳粉樣品前處理,提供更潔凈的樣品,提高靈敏度、延長色譜柱及儀器壽命
3.使用Amide色譜柱分析,用一般反相流動(dòng)相保留極性化合物,方法簡單快速
實(shí)驗(yàn)結(jié)果及色譜圖
5種核苷酸混合標(biāo)準(zhǔn)品的6針連續(xù)進(jìn)樣分析結(jié)果
實(shí)際樣品6針連續(xù)進(jìn)樣分析圖譜
小結(jié):
本實(shí)驗(yàn)采用Waters ACQUITY UPLC® H-Class 系統(tǒng),BEHTM Amide 1.7μm
2.1*100mm色譜柱,對嬰幼兒奶粉中的5種核苷酸進(jìn)行分析方法的開發(fā),實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:
2.1*100mm色譜柱,對嬰幼兒奶粉中的5種核苷酸進(jìn)行分析方法的開發(fā),實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:
1.在Waters ACQUITY UPLC H-Class 系統(tǒng)上,采用BEH Amide 1.7μm 2.1*100mm色譜柱能迅速分離奶粉中5種核苷酸標(biāo)準(zhǔn)品,且5種化合物的分離度均在3.0以上;對于實(shí)際的奶粉樣品,5種核苷酸樣品及雜質(zhì)之間的分離度均在1.6以上。
2.該分析方法重現(xiàn)性好。其中,奶粉樣品6次連續(xù)進(jìn)樣分析結(jié)果中,5種核苷酸保留時(shí)間RSD值均小于0.12%。
3.Waters ACQUITY UPLC H-Class 系統(tǒng),具有四元溶劑的Auto•Blend PlusTM功能,因此,在該系統(tǒng)上進(jìn)行方法開發(fā)非常靈活、方便,節(jié)約了溶劑配置的大量時(shí)間,大大提高了實(shí)驗(yàn)的效率,從而大幅度的降低了實(shí)驗(yàn)的溶劑消耗,降低了實(shí)驗(yàn)成本。
產(chǎn)品訂購及促銷信息:
Oasis HLB 6cc/150mg
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P/N 186003379
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XBridge Amide 3.5μm 4.6*150mm column
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P/N 186004869
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ACQUITY UPLC BEH Amide 1.7μm 2.1*100mm
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P/N 186004801
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