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微生物實(shí)驗(yàn)室常用的儀器設(shè)備及使用的注意事項(xiàng)

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2024-09-09  來(lái)源:網(wǎng)絡(luò)
核心提示:1、超凈工作臺(tái)微生物的培養(yǎng)都是在特定培養(yǎng)基中進(jìn)行無(wú)菌培養(yǎng),那么無(wú)菌培養(yǎng)必然需要超凈工作臺(tái)提供一個(gè)無(wú)菌的工作環(huán)境。超凈工作臺(tái)

1、超凈工作臺(tái)

微生物的培養(yǎng)都是在特定培養(yǎng)基中進(jìn)行無(wú)菌培養(yǎng),那么無(wú)菌培養(yǎng)必然需要超凈工作臺(tái)提供一個(gè)無(wú)菌的工作環(huán)境。超凈工作臺(tái)的主要用途是微生物的接種及處理時(shí)的無(wú)菌操作。

2、無(wú)菌室(接種室)或接種箱

要培養(yǎng)微生物,首先就需要接種,而接種必須在無(wú)菌條件下進(jìn)行。這就需要建造無(wú)菌室或接種箱,為接種創(chuàng)造必要的條件。無(wú)菌室可以建在實(shí)驗(yàn)室內(nèi),作為實(shí)驗(yàn)室的一個(gè)小套間。面積為4~5平方米,高2.5米左右。無(wú)菌室外應(yīng)連接一個(gè)小緩沖間,面積為2平方米左右。緩沖間和無(wú)菌室的門(mén)不要建在同一條直線上,以減少空氣中雜菌進(jìn)入無(wú)菌室。無(wú)菌室和緩沖間應(yīng)作到清潔、密閉性好,室內(nèi)最好有換氣設(shè)備,以便在工作結(jié)束后更換室內(nèi)空氣。兩個(gè)房間中應(yīng)各安裝1盞30瓦紫外線燈管和照明用的日光燈,無(wú)菌室的紫外線燈應(yīng)懸吊在工作臺(tái)的正上方,距臺(tái)面1米,以發(fā)揮最大的消毒功能。無(wú)菌室內(nèi)的工作臺(tái)等用具用品,應(yīng)經(jīng)常保持清潔,避免雜菌污染。如果沒(méi)有條件建造無(wú)菌室,可以用木制的接種箱代替。接種箱結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,容易制作,其正面安裝玻璃,便于觀察。箱前方開(kāi)兩個(gè)圓洞各接連1只套袖,操作時(shí)將兩臂從套袖伸入箱內(nèi)進(jìn)行操作。箱內(nèi)也應(yīng)懸吊一盞紫外線殺菌燈和一盞日光燈。

3、培養(yǎng)箱

培養(yǎng)箱有很多種類(lèi)型,它的用途在于為微生物提供一個(gè)適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。主要類(lèi)型包括生化培養(yǎng)箱,霉菌培養(yǎng)箱,厭氧培養(yǎng)箱等。它們的區(qū)別主要在于:

a.生化培養(yǎng)箱只能控制溫度。這類(lèi)培養(yǎng)箱可作為一般細(xì)菌的平板培養(yǎng)。

b.霉菌培養(yǎng)箱可以控制濕度和溫度。它主要用在霉菌的培養(yǎng)。

c.CO2培養(yǎng)箱適用于厭氧微生物的培養(yǎng),例如,雙歧桿菌。

4、天平

它是用于精確稱量各類(lèi)試劑。實(shí)驗(yàn)室常用的是電子天平,電子天平按照精度不同又有不同的級(jí)別。

5、微生物均質(zhì)器

它的作用在于從固體樣品中提取細(xì)菌。用微生物均質(zhì)器制備微生物檢測(cè)樣本具有樣品無(wú)損傷、無(wú)污染、不升溫、不需要洗刷器皿,不需滅菌處理等特點(diǎn),是微生物實(shí)驗(yàn)中使用較為方便的儀器。

6、菌落計(jì)數(shù)器

菌落計(jì)數(shù)儀可幫助操作者計(jì)數(shù)菌落數(shù)量。通過(guò)放大、拍照、計(jì)數(shù)等方式準(zhǔn)確獲取菌落的數(shù)量。有些高性能的菌落計(jì)數(shù)器還可直接連接電腦來(lái)完成自動(dòng)計(jì)數(shù)的操作,方便快捷的計(jì)數(shù)。

7、微波爐/電爐

它主要用于溶液的快速加熱,微生物固體培養(yǎng)基的加熱熔化。

8、高壓滅菌鍋

微生物學(xué)所用到的大部分實(shí)驗(yàn)物品、培養(yǎng)基、試劑都應(yīng)嚴(yán)格通過(guò)消毒滅菌。滅菌鍋也有不同的大小型號(hào),有些是手動(dòng)的,有些是全自動(dòng)的。用戶就要根據(jù)自己的需要選購(gòu)。

9、移液器

它是用于精密量取各類(lèi)液體。常見(jiàn)的液體量器有量筒、微量取液器、移液管、刻度試管、燒杯等。

10、冰箱

箱是實(shí)驗(yàn)室中保存試劑和樣品必不可少的儀器。微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中用到的試劑有些要求是4度保存,有些要求是負(fù)20度保存,實(shí)驗(yàn)人員一定要看清試劑的保存條件,放置在恰當(dāng)?shù)臏囟认卤4妗?/span>

具體來(lái)說(shuō),不同溫度下保存的物品如下:

a.4℃適合儲(chǔ)存某些溶液、試劑、藥品等。

b.-20℃適用于某些試劑、藥品、配好的抗生素等。

c.-80℃適合某些長(zhǎng)期低溫保存的樣品、大腸桿菌菌種、感受態(tài)等的保存。

11、生物安全柜

微生物實(shí)驗(yàn)中所涉及到的部分試劑和樣品微生物有些是有毒的,對(duì)于操作人員來(lái)說(shuō)傷害比較大。為了防止有害的懸浮微粒、氣溶膠的擴(kuò)散,可以利用生物安全柜對(duì)操作人員、樣品及樣品間交叉感染和環(huán)境提供安全的保護(hù)作用。

12、搖床

搖床是實(shí)驗(yàn)室比較常用的一種儀器,在微生物實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中,液體培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需要在特定溫度下振蕩使用。

13、純水裝置

純水裝置包括純水機(jī)和蒸餾水器。蒸餾水器的價(jià)格比較便宜,但在造水過(guò)程中需要有人值守;純水機(jī)價(jià)格高些,但是使用方便,可以儲(chǔ)存一定量的純水。純水的使用也有不同級(jí)別,實(shí)驗(yàn)中配制試劑,配制培養(yǎng)基均都需用純水。

14、生物顯微鏡

由于微生物的體積比較小,所以在觀察時(shí)需要借助生物顯微鏡。生物顯微鏡主要用于微生物和微小物品結(jié)構(gòu)和形態(tài)等方面的觀察。

15、冷凍干燥機(jī)

主要適用于細(xì)菌、微生物、酵母等的干燥作用。用于干燥保存易脫水的產(chǎn)品,在加水以后能夠再次恢復(fù)原材料的特性,不影響其生物活性。通過(guò)冷凍干燥,細(xì)菌之類(lèi)的材料成為干燥狀態(tài),從而不會(huì)發(fā)生化學(xué)改變。

16、分光光度計(jì)

分光光度計(jì)在微生物試驗(yàn)中用于測(cè)定微生物懸液的濃度,可以正確選取合適的培養(yǎng)時(shí)間。一般是在600nm波長(zhǎng)測(cè)定菌液濃度。

17、恒溫箱

用于恒溫條件下培養(yǎng)微生物。恒溫箱的調(diào)溫范圍一般為20~45℃之間。培養(yǎng)酵母菌和霉菌時(shí),一般可調(diào)至28℃,培養(yǎng)細(xì)菌和放線菌時(shí),可根據(jù)菌種的生長(zhǎng)溫度進(jìn)行調(diào)溫,一般為30~37℃。

18、電烘箱(干燥箱)

用于玻璃器皿等物的烤干和滅菌。電烘箱的調(diào)溫的范圍一般為40~180℃,對(duì)玻璃器皿等物進(jìn)行滅菌時(shí),可將溫度調(diào)至160℃,滅菌4小時(shí),即可將器皿上的微生物全部殺死。滅菌完畢后,在電烘箱溫度還沒(méi)有降到50~70℃以前,不要打開(kāi)電烘箱,以免器皿破裂。

19、恒溫水浴鍋

水浴鍋是一種控溫裝置,水浴控溫對(duì)于樣品來(lái)說(shuō)比較快速且接觸充分。有些微生物反應(yīng)需要在37度,42度,56度下水浴進(jìn)行,所以恒溫水浴鍋可以提供需要的溫度

20、酸度計(jì)

用于配制試劑時(shí)精確測(cè)量pH值,從而保證配制的溶液的精確性。有時(shí)也需要利用pH計(jì)測(cè)定樣品溶液的酸堿度。

21、離心機(jī)

用于收集微生物菌體以及其他沉淀物。離心機(jī)有冷凍和常溫之分。有些樣品由于在常溫下不太穩(wěn)定,需要低溫環(huán)境,要視樣品的種類(lèi)而定。

離心機(jī)清洗要求:在離心機(jī)內(nèi)腔,設(shè)置多個(gè)清洗頭或清洗管,離心機(jī)可在不開(kāi)蓋或運(yùn)轉(zhuǎn)過(guò)程中對(duì)離心機(jī)內(nèi)部進(jìn)行清洗。

重點(diǎn)有以下幾個(gè)部位:①轉(zhuǎn)鼓底面及軸承座部位的清洗;②攔液板表面及轉(zhuǎn)鼓筒體外表面;③轉(zhuǎn)鼓筒體內(nèi)表面;④翻蓋內(nèi)表面及進(jìn)料、刮刀等裝置表面;⑤外殼內(nèi)表面。

離心機(jī)維護(hù)規(guī)則:

(1)一次規(guī)則

當(dāng)系統(tǒng)出了故障,你可以試探性地改變某些狀態(tài),一次可以改變一個(gè)參數(shù)。做一些簡(jiǎn)單的改變步驟,也許就能解決問(wèn)題。

(2)二次比較規(guī)則

在動(dòng)手檢修之前已經(jīng)明確了故障所在,或者已經(jīng)確定了解決故障的方案。換句話說(shuō),動(dòng)手之前已經(jīng)找對(duì)了解決辦法。例如,在進(jìn)樣過(guò)程中發(fā)現(xiàn)內(nèi)標(biāo)物的峰值變低了,可以重復(fù)進(jìn)樣看看重復(fù)性如何,如果是偶然變低,是否是定量管里進(jìn)了氣泡。這個(gè)規(guī)則可用于考察系統(tǒng)改變后的情況。更換了流動(dòng)向后在正式進(jìn)樣前可以進(jìn)兩次標(biāo)準(zhǔn)品以檢查保留時(shí)間的穩(wěn)定情況和色譜峰的穩(wěn)定性。在梯度洗脫中如果出現(xiàn)了多余的峰,可以空載梯度洗脫一次,用此規(guī)則可以避免不必要的改變,盡快確定糾正措施。

(3)取代規(guī)則

用好的部件換下可疑的部件,是查找故障的最好方法。如果你懷疑檢測(cè)器引起了噪音,就換一個(gè)性能好的無(wú)轉(zhuǎn)子硫化儀檢測(cè)器。如果故障被排除了,就說(shuō)明換下的檢測(cè)器有問(wèn)題。這個(gè)規(guī)則應(yīng)用的規(guī)模有大有小,可以從換整個(gè)部件到換印刷線路板上的集成塊。

(4)換回規(guī)則

這個(gè)規(guī)則和取代規(guī)則一起運(yùn)用,好部件取代了溶體流動(dòng)速率測(cè)定儀可疑部件后情況并未得到改善,應(yīng)重新?lián)Q上原部件。這樣做的維修費(fèi)用最小,也防止了用過(guò)的部件積壓下來(lái)無(wú)轉(zhuǎn)子硫化儀。這條規(guī)則僅適用于單一的故障。

換回原則不適用于以下的情況:

①在取下時(shí)新部件已損壞(如泵密封墊圈);

②部件價(jià)格低(如柱內(nèi)襯過(guò)濾片);

③重新裝上原部件要冒損壞的風(fēng)險(xiǎn);

④定期更換的部件。

22、液氮罐

液氮罐儲(chǔ)存液氮,可用于細(xì)菌、酵母、霉菌和大型真菌等各種微生物的長(zhǎng)期保存。

23、接種針

用于接種和分離微生物。根據(jù)不同用途做成針狀、環(huán)狀、鉤狀、刀狀和鏟狀等。接種針由針頭和針柄兩部分組成。針頭由白金或鉻鎳合金(細(xì)電爐絲)制成,長(zhǎng)約7厘米。針柄可用玻璃棒或鋁管制成,長(zhǎng)約20厘米。將針頭燒結(jié)在針柄上即成。

24、酒精燈

用于接種時(shí)對(duì)接種工具進(jìn)行滅菌。酒精燈火焰上部熱度最高,應(yīng)利用這一最高溫度區(qū)燒灼接種針或試管口。

25、均質(zhì)器

均質(zhì)器使樣品處理過(guò)程中不可缺少的設(shè)備。常用的均質(zhì)器主要是旋轉(zhuǎn)均質(zhì)器和拍擊式均質(zhì)器。旋轉(zhuǎn)式均質(zhì)器是靠旋轉(zhuǎn)的刀片將均質(zhì)杯中的樣品打碎。缺點(diǎn)是每次均質(zhì)都要更換刀片和均質(zhì)杯,樣品易受到污染,均質(zhì)過(guò)程中容易產(chǎn)生熱量使樣品中的微生物受損。拍擊式均質(zhì)器使用無(wú)菌均質(zhì)袋,拍擊的機(jī)械裝置作用在均質(zhì)袋上,不和樣品直接接觸,因此不會(huì)受污染。拍擊式均質(zhì)器由于使用方便,不易受污染,使用越來(lái)越廣泛。但其缺點(diǎn)是均質(zhì)的力量不足,對(duì)于堅(jiān)硬的樣品不但無(wú)法均質(zhì)均勻,還會(huì)引起均質(zhì)袋的破損。

使用注意事項(xiàng):

(1)使用前先將電源插頭固定牢靠后,再打開(kāi)機(jī)器開(kāi)關(guān)。插頭不能使其出現(xiàn)松動(dòng),因?yàn)闄C(jī)器工作時(shí)會(huì)產(chǎn)生振動(dòng)導(dǎo)致插頭脫落。這種突然短點(diǎn)對(duì)機(jī)器會(huì)造成損傷。

(2)均質(zhì)器工作時(shí)不準(zhǔn)隨便打開(kāi)均質(zhì)器門(mén),防止樣液飛濺(有的均質(zhì)器打開(kāi)門(mén)以后自動(dòng)停止拍擊均質(zhì)),一定要先關(guān)機(jī)器再開(kāi)門(mén),然后同樣關(guān)閉門(mén)之后再開(kāi)機(jī)。

(3)使用均質(zhì)器之前,一定要檢查均質(zhì)器內(nèi)是否有異物,防止損傷機(jī)械裝置或均質(zhì)袋。

(4)堅(jiān)硬樣品,盡量不要用拍打式均質(zhì)器,防止均質(zhì)袋破裂,冷凍樣品需緩化解凍以后才能使用拍擊式均質(zhì)器。當(dāng)一定要拍打堅(jiān)硬樣品時(shí),最好加套均質(zhì)袋。

(5)均質(zhì)器的底部是空的,如遇均質(zhì)袋意外破裂時(shí),方便清理溢出物。

(6)均質(zhì)器和均質(zhì)袋放置在陰涼干燥處,特別是均質(zhì)袋應(yīng)避酸堿、避陽(yáng)光,防止其過(guò)早的變脆老化。

(7)均質(zhì)器用完之后,先關(guān)機(jī)斷電,然后將其內(nèi)外清理干凈。

(8)對(duì)于一些拍打均質(zhì)后,容易堵塞移液管或移液器槍頭的樣品,建議使用帶過(guò)濾網(wǎng)的無(wú)菌均質(zhì)袋。

26、常用玻璃器皿

①培養(yǎng)皿(平皿):用于盛放固體培養(yǎng)基,是培養(yǎng)微生物和觀察微生物的主要器皿。一般直徑為9厘米?筛鶕(jù)活動(dòng)規(guī)模準(zhǔn)備若干個(gè)。

②試管:用于盛放斜面培養(yǎng)基(固體),是接種微生物的主要器皿。常用的有兩種。較大的長(zhǎng)220毫米,直徑20毫米;較小的長(zhǎng)150毫米,直徑15毫米。可根據(jù)需要選用其中一種并準(zhǔn)備若干個(gè)。

③錐形瓶:用于盛放液體培養(yǎng)基。是用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物的主要器皿。一般容量為50、100、250、300、500、1000毫升。可根據(jù)活動(dòng)需要選擇和準(zhǔn)備。

④量筒、量杯:用于定量量取各種液體。

⑤移液管(吸管):一般容量為0.5、1、5、10毫升等,可根據(jù)需要選擇和準(zhǔn)備。

⑥其它:燒杯、漏斗等。注意事項(xiàng):以上介紹的是微生物實(shí)驗(yàn)室的基本儀器配置,在組建實(shí)驗(yàn)室時(shí)還需要其他一些耗材,例如試管架,無(wú)菌采樣及稱樣袋,接種環(huán),三角瓶,量筒,脫脂棉,紗布,試管筐,玻璃試管,滅菌吸管,涼干架,剪刀,鑷子,過(guò)濾器等。
藥物微生物

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編輯:songjiajie2010

 
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