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解讀標(biāo)準(zhǔn)中的菌種復(fù)蘇、傳代

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2024-05-08  來(lái)源:藥物微生物檢驗(yàn)公眾號(hào)
核心提示:解讀標(biāo)準(zhǔn)中的菌種復(fù)蘇、傳代

【文章來(lái)源】藥物微生物檢驗(yàn)公眾號(hào)

藥品中的成分復(fù)雜,包括有效成分、輔料(淀粉、糊精、色素等),這些成分當(dāng)中的有機(jī)物很容易遭受微生物污染。在藥品生產(chǎn)過(guò)程中,微生物檢測(cè)是評(píng)價(jià)產(chǎn)品質(zhì)量和安全性的重要指標(biāo)之一。在微生物檢測(cè)的過(guò)程中,菌種保藏是一項(xiàng)重要的基礎(chǔ)性工作。使用正確的方法對(duì)菌種進(jìn)行保藏可以有效地避免菌種的死亡、退化和污染,便于生產(chǎn)及科學(xué)研究。國(guó)家也頒布了相應(yīng)的法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)。

一、菌種的復(fù)蘇

1.制備菌懸液母液:根據(jù)微生物的種類,向凍干菌種管中加入適量適合微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)液(如表1.1[1] 注意是液體培養(yǎng)基),混合均勻。

表1.1 不同菌種適用的液體培養(yǎng)基

菌株種類

培養(yǎng)液

細(xì)菌

營(yíng)養(yǎng)肉湯

白色念珠菌

沙堡液體培養(yǎng)基

分枝桿菌

蘇通綜合液體培養(yǎng)基

黑曲霉菌

麥芽浸膏營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基

 

2.將菌懸液按照合適的比例加入到含有培養(yǎng)液的試管中,根據(jù)微生物的種類確定培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間(表1.2)[1],進(jìn)行菌種復(fù)蘇。培養(yǎng)后的微生物為第1代培養(yǎng)物。

表1.2 不同菌種的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間

菌株種類

培養(yǎng)溫度

培養(yǎng)時(shí)間

一般菌種

36 ℃±1 ℃

18 h~24 h

黑曲霉菌

30 ℃±1 ℃

42 h~48 h

二、菌種傳代

1.根據(jù)菌株種類選擇合適的固體平皿培養(yǎng)板(如表2.1[1]注意是固體培養(yǎng)基),取第1代培養(yǎng)物進(jìn)行劃線接種,并在適宜溫度和培養(yǎng)時(shí)間下培養(yǎng)。平皿上長(zhǎng)出的菌落為第2代培養(yǎng)物。

表2.1 不同菌種適用的固體培養(yǎng)基

菌株種類

培養(yǎng)液

細(xì)菌

營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基

白色念珠菌

營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基

分枝桿菌

改良羅氏培養(yǎng)基或其他商品化分枝桿菌專用復(fù)合瓊脂培養(yǎng)基

黑曲霉菌

麥芽浸膏瓊脂培養(yǎng)基

2.在含有第2代培養(yǎng)物的平皿上挑取典型菌落,接種到相應(yīng)的培養(yǎng)基平皿或斜面上,在適宜溫度和培養(yǎng)時(shí)間下培養(yǎng)(表2.2)[1],記為第3代培養(yǎng)物。

表2.2 不同菌種的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間

菌株種類

培養(yǎng)溫度

培養(yǎng)時(shí)間

一般菌種

36 ℃±1 ℃

18 h~24 h

分枝桿菌

36 ℃± 1℃

72 h

黑曲霉菌

30 ℃±1 ℃

42 h~48 h

3.按照上述方法將菌種培養(yǎng)至所需代數(shù)即可。

三、流程示意圖

圖片編輯_05(1)

四、操作要點(diǎn)

1.選擇合適的培養(yǎng)基很重要。

2.全程無(wú)菌操作,避免污染。

3.培養(yǎng)時(shí)間不要過(guò)長(zhǎng)。

4.信息標(biāo)注很重要(菌種名稱、菌種號(hào)、代數(shù)、傳代日期等)。

五、參考文獻(xiàn)

[1]WST683-2020 消毒試驗(yàn)用微生物要求

具體的操作細(xì)節(jié)依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)即可,小編就不贅述了。需要WS/T 683電子版的小伙伴記得關(guān)注公眾號(hào)后,加小編微信好友領(lǐng)取哦!

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編輯:songjiajie2010

 
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