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腸球菌及檢驗

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2010-09-01
核心提示: 一、概況  細菌分類學上,腸球菌屬早期并不存在,現(xiàn)今的一些菌種本歸屬于鏈球菌屬,1989年,依據(jù)Facklam和Collins

一、概況

  細菌分類學上,腸球菌屬早期并不存在,現(xiàn)今的一些菌種本歸屬于鏈球菌屬,1989年,依據(jù)Facklam和Collins的分類,腸球菌屬內(nèi)包括十二個種及一個變異株,它們是:

  糞腸球菌(E.faecalis) 屎腸球菌(E.faecium)

  鳥腸球菌(E.avium) 酪黃腸球菌(E.casseliflavus)

  堅忍腸球菌(E.durans) 雞腸球菌E.galinarum)

  芒地腸球菌(E.mundii) 惡臭腸球菌(E.maladoratum)

  希拉腸球菌(E.hirae) 孤立腸球菌(E.solitarius)

  棉子糖腸球菌(E.raffinosus) 假鳥腸球菌(E.pseudoavium)

  糞腸球變異株(E.faecalis var)。

  糞腸球菌為該屬中最常見的即為代表種。該屬通常指糞便來的可以用氮鈉分離鑒定的一群革蘭氏陽性球菌。由于腸球菌的菌種均含有Lancefield的D群抗原,亦稱D群糞腸球菌或D群腸球菌。腸球菌的DNA G+C含量33%-39%mol。

  腸球菌普遍存在于自然界,一般棲居在各種溫血和冷血動物的腔腸,甚至昆蟲體內(nèi),也是健康人體的上呼吸道,口腔或腸道的常居菌。本菌可以引起心內(nèi)膜炎,膽囊炎,腦膜炎,尿路感染及傷口感染等多種疾病。在人類糞便中的數(shù)量僅次于大腸菌群,每克成人的糞便中約含2×108個。由于此污染指示菌比較大腸桿菌對外界環(huán)境溫度適應性強、抵抗力強及耐受性強,甚至可以與多種抗生素相抵抗和生長營養(yǎng)要求不高,因此在自然界分布廣,存活力持久。在無糞便污染的環(huán)境中較大腸菌更易發(fā)現(xiàn),所以,即使檢出腸球菌也沒有糞便污染的指示作用。此外,即使在冷凍,干燥性和經(jīng)中等強度加熱處理的食品中檢出腸球菌也不能提示腸道致病菌的存在,因為腸球菌比沙門氏菌,致病性大腸桿菌抵抗性及存活率均高。

  食品微生物檢驗主要針對在10℃和45℃下可生長發(fā)育的糞腸球菌與屎腸球菌,二者在生化特性、DNA雜交結果有明顯不同。在45℃條件下,用含疊氮鈉成分的培養(yǎng)基檢測此類指示菌是其主要特征。

  目前該菌多作為生活飲用水,管道水和一些水質(zhì)的指示菌。衛(wèi)生學家認為,腸球菌類似于大腸菌群的生態(tài)活動,但其對惡劣的外環(huán)境和冷凍條件具有較強的抵抗力,作為監(jiān)測水質(zhì)衛(wèi)生,環(huán)境衛(wèi)生質(zhì)量的污染指標更具有衛(wèi)生學意義。另據(jù)有關報道,大量的(109以上)腸球菌可以引起食物中毒,作為一個有衛(wèi)生學意義的細菌(該菌的污染在某些食品中也常被發(fā)現(xiàn)),有些國家已經(jīng)制定了針對腸球菌污染限量標準,大多制定在0/克~105/克范圍內(nèi)。從預防食物中毒方面,保障人民身體健康考慮,借鑒國外標準,制定適宜的污染限量指標,應盡快擺到議事日程上來。

二、生物學性狀

1、形態(tài)與染色

  腸球菌屬的細菌為革蘭氏陽性球菌,多數(shù)菌種成雙或呈短鏈狀排列;一般無芽胞,無莢膜,少數(shù)菌種有鞭毛,陳舊培養(yǎng)物或在厭氧狀態(tài)下有時呈革蘭氏陰性。

2、培養(yǎng)特性

  在普通瓊脂及麥康凱瓊脂上形成小菌落,在血瓊脂上形成較鏈球菌稍大的菌落,光滑、較濕潤、易乳化,依據(jù)種的不同,α、β或γ溶血均可出現(xiàn)。在液體培養(yǎng)基中呈均勻渾濁生長,也較易形成長鏈。需氧或兼性厭氧,最適生長溫度37℃,最適pH為4.7-7.6,屬內(nèi)各菌種均能在6.5%氯化鈉肉湯,pH9.6葡萄糖肉湯及45℃生長,個別菌種在50℃時生長快。

3、抗原結構

  Lancefied血清系統(tǒng)屬D群,其特異性抗原決定簇是位于細胞壁中的甘油壁酸,本質(zhì)上是多糖類,含有N-乙酰己糖胺。

4、生化反應

  過氧化氫酶呈陰性,能分解葡萄糖、麥芽糖生成酸,多數(shù)菌株分解甘露醇;膽汁七葉苷水解、萬古霉素敏感性及咯烷基芳基酰胺酶均為陽性;耐一定程度的酸堿、耐鹽和40%的膽鹽;結合D群抗血清進行血清學鑒定可用來區(qū)分腸球菌與鏈球菌,乳球菌屬。依據(jù)甘露醇、山梨醇、山梨糖產(chǎn)酸及精氨酸脫氨基四個關鍵性的生化生理實驗,可將腸球菌分為三個群。

三、腸球菌屬主要檢測步驟如下:

 

 

檢樣

AC培養(yǎng)基

36℃ ↓ 48±3h

↓ ↓

(推斷試驗陰性) (推斷試驗陽性)

     ↓

    AC培養(yǎng)基

   45±0.5℃↓ 48±3h

   ↓   ↓

   (確定試驗陰性)  (確定試驗陽性)

      ↓

     葡萄糖瓊脂

  36±1℃ ↓48±3h

  單獨集落

  ↓

  葡萄糖肉湯

  ↓

  ↓   ↓

6.5%氯化鈉葡萄糖   葡萄糖瓊脂斜面

36±1℃↓48±3h   36±1℃↓24±2h

↓       ↓

    ↓     過氧化氫酶(-)

   ↓    革蘭氏陽性球菌

↓       ↓

-----------------

(完全試驗陽性)

編輯:foodadmin

 
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關鍵詞: 腸球菌
 

 
 
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