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沙門氏菌及檢驗

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2010-09-01
核心提示:  人沙門氏菌病有四類綜合癥:沙門氏菌病;傷寒;非傷寒型沙門氏菌敗血癥和無癥狀帶菌者。沙門氏菌胃腸炎是由除傷寒沙門氏菌外

  人沙門氏菌病有四類綜合癥:沙門氏菌;傷寒;非傷寒型沙門氏菌敗血癥和無癥狀帶菌者。沙門氏菌胃腸炎是由除傷寒沙門氏菌外任何一型沙門氏菌而所致,通常表現(xiàn)為輕度,持久性腹瀉。傷寒實際上是由傷寒沙門氏菌所致。未接受過治療的病人致死率可超過10%,而對經(jīng)過適當(dāng)醫(yī)療的病人其致死率低于1%,幸存者可變成慢性無癥狀沙門氏菌攜帶者。這些無癥狀攜帶者不顯示發(fā)病癥狀仍能將微生物傳染給其他人(傳統(tǒng)的例子就是瑪麗傷寒)。

  非傷寒型沙門氏菌敗血癥可由各型沙門氏菌感染所致,能影響所有器官,有時還引起死亡。幸存者可變成慢性無癥狀沙門氏菌攜帶者。

一、致病性

  沙門氏菌胃腸炎,潛伏期一般6-72小時,主要癥狀為惡心、嘔吐、腹絞痛、腹瀉、發(fā)熱寒顫頭痛。病程一般1-2天或更長。感染劑量為15-20個菌,死亡率達1-4%。最易感群體是年幼兒童、虛弱者、年長老人、免疫缺陷者等。污染源主要是人和家畜的糞便,沙門氏菌常存在于動物中,特別是禽類和豬。在許多環(huán)境中也有存在。從水,土壤,昆蟲中,從工廠和廚房設(shè)施的表面和動物糞便中已發(fā)現(xiàn)該類細菌。它們可以存在于多類食品中,包括生肉,禽,奶制品和蛋,魚,蝦和田雞腿,酵母,椰子,醬油和沙拉調(diào)料,蛋糕粉,奶油夾心甜點,頂端配料,干明膠,花生露,橙汁,可可和巧克力。

  沙門氏菌屬也是嗜溫性細菌,在中等溫度,中性pH,低鹽和高水活度條件下生長最佳。生長最低水活度為0.94。兼性厭氧,對中等加熱敏感。同樣,該菌屬能適應(yīng)酸性環(huán)境。通過衛(wèi)生以防止二次污染;蒸煮;巴氏消毒等控制。正常家庭烹調(diào),個人衛(wèi)生可以防止煮熟食品的二次污染,以及控制時間和溫度一般都能充分防止沙門氏菌病的發(fā)生。

二、檢驗

  因沙門氏菌是最常見的食源性細菌病原體,因此在本節(jié)中重點介紹沙門氏菌的檢驗。沙門氏菌是食物傳播病原菌中研究最活躍的細菌。從食品中分離和鑒定沙門氏菌,當(dāng)前通用的方法學(xué)分5個步驟:

  1.前增菌-第一步使食物樣品在含有營養(yǎng)的非選擇性培養(yǎng)基中增菌,使受損傷的沙門氏菌細胞恢復(fù)到穩(wěn)定的生理狀態(tài)。

  2.選擇性增菌-在含選擇性抑制劑的促生長培養(yǎng)基中間,樣品進一步增菌的一個步驟。此培養(yǎng)基允許沙門氏菌持續(xù)增殖,同時阻止大多數(shù)其他細菌的增殖。

  3.選擇性平板分離-這一步采用固體選擇性培養(yǎng)基,抑制非沙門氏菌的生長,提供肉眼可見的疑似沙門氏菌純菌落的識別。

  4.生物化學(xué)篩選-排除大多數(shù)非沙門氏菌。也提供了沙門氏菌培養(yǎng)物菌屬的初步鑒定。

  5.血清學(xué)技術(shù)提供了培養(yǎng)物菌種的鑒定。

  這五個步驟代表理想狀況。不過一個有經(jīng)驗的檢驗員,可能在一個或幾個步驟中看出特性和差別。

  目前檢驗食品中的沙門氏菌是按統(tǒng)計學(xué)取樣方案為基礎(chǔ),25g食品為標(biāo)準(zhǔn)分析單位。

三、從食品中分離沙門氏菌樣品的制備

  下面的方法是以25g樣品為檢測單位,樣品:肉湯為1∶9的比例。除非另有說明,根據(jù)混合程度,加足夠的肉湯保持1∶9的比例。對不需準(zhǔn)確稱量檢測的樣品,例如:田雞腿,可參看特定方法說明。

1、干蛋黃、干蛋白、干全蛋、液奶(去脂牛奶,含2%脂肪牛奶,全脂奶,和脫脂奶)、粉狀調(diào)制食品(蛋糕,甜餅,炸面圈,餅干和面包)、嬰兒食品、口食或軟管進食含蛋的食品:

  檢驗前的冷凍樣品最好不要解凍。如果冷凍樣品必須軟化以獲取待檢測部分,則盡可能迅速的解凍所需部分,使競爭菌數(shù)少增加或降低沙門氏菌的可能損傷。解凍需在45℃以下,有自動調(diào)溫器自控的水浴鍋內(nèi)不斷攪拌進行15min或在2�5℃,18小時內(nèi)解凍。無菌操作稱取25g樣品,放入滅菌帶螺旋帽的廣口瓶中(500mL)或其他合適的容器內(nèi)。非粉狀的樣品,加入225mL滅菌乳糖肉湯。如果制品是粉狀,加入約15mL滅菌乳糖肉湯,用滅菌玻璃棒,匙或滅菌壓舌器攪拌,使成均勻懸液。再加3份乳糖肉湯10mL,10mL,190mL,使總量為225mL。充分?jǐn)嚢,直到樣品完全懸浮沒有團塊為止。蓋緊瓶蓋在室溫靜置60min。振搖使充分混勻,用試紙測定pH值。必要時用滅菌的1NNaOH或1NHcl調(diào)節(jié)pH至6.8±0.2。在測定最終pH前要蓋緊瓶蓋并充分混勻。然后將瓶蓋旋松約1/4圈,置35℃培養(yǎng)24±2小時。以下步驟按四,1-10進行。

2、蛋類:

  A、含殼蛋:用硬刷子在水流下刷洗蛋。把蛋在含0.1%十二烷酸磺酸鈉(SDS)的200ppm氯離子溶液中浸泡30min。加8mL 5.25%次氯酸鈉到含1g SDS的992mL蒸餾水中,制備200ppm cl-/0.1%SDS溶液。這種消毒劑需在使用前臨時制備。無菌操作打開蛋,使用滅菌的蛋分離器,棄去蛋白。無菌操作稱取25g蛋黃到滅菌的500mL錐型瓶或其他合適容器內(nèi)。加225mL胰胳胨(胰化物)大豆肉湯(TSB),并振蕩充分混勻。在室溫下靜置60分鐘。振搖使其充分混勻,用試紙測定pH值。必要時調(diào)節(jié)pH值至6.8±0.2,置35℃培養(yǎng)24±2小時,以下步驟按四,1-10繼續(xù)。

  B、液全蛋(均狀):無菌操作稱25g置于無菌的500mL錐形燒瓶或其它合適容器中。加225mLTSB并振蕩充分混勻。按上面所述繼續(xù)。

  C、煮硬的蛋(雞蛋,鴨蛋或其他蛋類):目前,不知道蛋白中的沙門氏菌抑制因子是否具有熱穩(wěn)定性。因此,無菌操作分離蛋白和蛋黃。稱取25g粉狀蛋黃固體到無菌500mL錐型瓶或其他合適容器中。加225mLTSB并旋轉(zhuǎn)充分混勻。按上面所述繼續(xù)。

3、脫脂乳粉

  A、速溶:無菌操作稱取25g樣品,加入滅菌燒杯(250mL)或其它合適容器內(nèi)。經(jīng)滅菌玻璃或紙質(zhì)(用帶卷好以備高壓滅菌)漏斗,往滅菌的500mL錐形燒瓶或其它合適容器中(裝有225mL煌綠水),緩緩傾注25g檢測單位,使其覆蓋在煌綠水表面。也可將多份25g檢驗單位按比例 倒入相應(yīng)份數(shù)的煌綠水表面。按每1000mL滅菌蒸餾水中加1%煌綠溶液2mL配置煌綠水。將盛有樣品�前增菌培養(yǎng)基的容器靜置60±5分鐘。松松地蓋上容器蓋,不需要混合或調(diào)節(jié)pH值,于35℃培養(yǎng)24±2小時,以下步驟按四,1-10繼續(xù)。

  B、非速溶:按上述A脫脂乳粉的方法進行,只不過不允許將多份檢驗單位按比例合并檢驗。

4、全脂奶粉:

  無菌操作稱取25g樣品,加入無菌的,帶螺旋帽的廣口瓶中(500mL)或其他合適的容器內(nèi)。加入225mL滅菌蒸餾水并振蕩充分混勻。蓋緊在室溫下靜置60分鐘。使其充分混勻,用試紙測定pH值。必要時調(diào)節(jié)pH值至6.8±0.2。在測定最終pH前要蓋緊瓶蓋并充分混勻。然后加0.45mL1%的煌綠染液并充分混勻。旋松瓶蓋約1/4轉(zhuǎn)后,置35℃培養(yǎng)24±2小時,以下步驟按四,1-10繼續(xù)。

5、酪蛋白:

  無菌操作稱取25g樣品,加入無菌均質(zhì)杯中,加225mL滅菌乳糖肉湯到樣品中并勻質(zhì)2分鐘。無菌操作,把已勻質(zhì)的混合物轉(zhuǎn)移到滅菌,帶螺旋帽的500mL廣口瓶或其他合適的容器內(nèi)。蓋緊蓋子在室溫下靜置60分鐘。振搖使充分混勻,用試紙測定pH值。必要時調(diào)節(jié)pH值至6.8±0.2。在測定最終pH前要蓋緊瓶蓋并充分混勻。旋松瓶蓋約1/4圈后,置35℃培養(yǎng)24±2小時,以下步驟按四,1-10繼續(xù)。

6、大豆粉:

  無菌操作稱取25g樣品,加入滅菌燒杯(250mL)或其它合適容器內(nèi)。用滅菌玻璃或紙質(zhì)(用帶卷好以備高壓滅菌)漏斗,往裝有225mL乳糖肉湯的滅菌的500mL錐形燒瓶或其它合適容器中,緩緩傾注25g檢測單位,使其覆蓋在乳糖肉湯表面。檢測單位(25g)不可多份按比例混合檢測。容器靜置60±5分鐘。松松地蓋上容器蓋,不需要混合或調(diào)節(jié)pH值,于35℃培養(yǎng)24±2小時,以下步驟按四,1-10繼續(xù)。

7、含蛋制品(面條,蛋卷,通心粉,意大利面條)、干酪、生面團、調(diào)制色拉(火腿,蛋,雞肉,金槍魚,火雞)、新鮮的、冷凍的、或干的水果和蔬菜、果仁、甲殼類動物(小蝦,蟹,小龍蝦,LANGOSTINOS,龍蝦)和魚:

  檢測前冷凍樣品最好不要解凍,如果冷凍樣品必須軟化以取其檢測部分,則要在持續(xù)攪拌并帶有自動調(diào)溫器控制的45℃水浴內(nèi)15分鐘內(nèi)解凍。或者在2�5℃18小時內(nèi)進行。

  無菌操作稱取25g樣品,加入滅菌的均質(zhì)器中。加入225mL滅菌的乳糖肉湯并均質(zhì)2分鐘。再無菌操作轉(zhuǎn)移已均質(zhì)的混合物到無菌的帶螺旋帽的廣口瓶中(500mL)或其他合適的容器內(nèi)。蓋緊瓶蓋,于在室溫下靜置60分鐘。振搖使其充分混勻,用試紙測定pH值。必要時調(diào)節(jié)pH值至6.8±0.2。充分混勻。旋松瓶蓋約1/4轉(zhuǎn)后,置35℃培養(yǎng)24±2小時,以下步驟按四,1-10繼續(xù)。

8、干酵母:

  無菌操作稱取25g樣品,放入滅菌帶螺旋帽的廣口瓶中(500mL),或其他合適的容器內(nèi)。加入225mL滅菌胰酪胨(胰化)大豆肉湯,充分混勻使酵母形成均勻懸液。蓋緊瓶蓋于在室溫下靜置60分鐘。振搖使其充分混勻,用試紙測定pH值。必要時,調(diào)節(jié)pH值至6.8±0.2,在測定最終pH前要混合充分。旋松瓶蓋約1/4轉(zhuǎn)后,置35℃培養(yǎng)24±2小時。非活性干酵母,以下步驟按D,1-11進行。活性干酵母,混勻經(jīng)培養(yǎng)過的樣品,轉(zhuǎn)種1mL到10mL月桂基蛋白(LST)中,另轉(zhuǎn)種1mL到10mL四磺酸鹽(TT)肉湯中。將此兩種選擇性肉湯于35℃培養(yǎng)24±2小時。充分地旋轉(zhuǎn)混合經(jīng)培養(yǎng)過的增菌肉湯,每種肉湯都要用3mm接種環(huán)劃線接種3個選擇性平板(四,3和四,4),接下面的四,5�10進行。

9、食品上霜和上頂用的混合物:

  無菌操作稱取25g樣品,放入滅菌,帶螺旋帽的廣口瓶或其他合適的容器中。加入225mL營養(yǎng)肉湯并充分混合。蓋緊瓶蓋在室溫下靜置60分鐘。振搖使其充分混勻,用試紙測定pH值。必要時,調(diào)節(jié)pH值至6.8±0.2。旋松瓶蓋約1/4轉(zhuǎn)后,置35℃培養(yǎng)24±2小時。以下步驟按四,1-10繼續(xù)。

10、調(diào)味品:

  A、黑胡椒、白胡椒、芹菜籽或者干辣椒粉、小茴香、紅辣椒、歐芹片、迷迷香、芝麻、麝香草、蔬菜片:無菌操作稱取25g樣品,放入滅菌帶螺旋帽的廣口瓶或其他合適的容器中。加入225mL滅菌胰酪胨大豆(TSB)肉湯,充分混勻,蓋緊瓶蓋于在室溫下靜置60分鐘。旋動混勻,用試紙測定pH值。必要時,調(diào)節(jié)pH值至6.8±0.2。旋松瓶蓋約1/4轉(zhuǎn)后,置35℃培養(yǎng)24±2小時。以下步驟按四,1-10繼續(xù)。

  B、洋蔥片、洋蔥粉、大蒜片:無菌操作稱取25g樣品,放入滅菌帶螺旋帽的廣口瓶或其他合適的容器中。將樣品于含K2SO3的TSB胰酪胨大豆肉湯(1000mLTSB加5g K2SO3使K2SO3的最終的濃度為0.5%)中進行前增菌。添加K2SO3于肉湯中。分裝225mL于500mL錐形瓶中,經(jīng)121℃高壓滅菌15分鐘。滅菌后無菌操作測定容量,必要時再調(diào)整至225mL。將225mL含K2SO3的無菌TSB加入樣品中,充分混勻。接下去按三,10A節(jié)進行。

  C、牙買加胡椒、桂皮、丁香及薄荷:目前還沒有方法可以中和這四種香料的毒性。將香料稀釋至無毒的程度,再進行菌檢。檢驗牙買加胡椒,桂皮和薄荷時,樣品與肉湯比例為1∶100,而丁麝香樣品與肉湯比例為1∶1000。檢查葉狀的調(diào)味品,因遇到脫水的制品,可吸收肉湯這一實際困難,其樣品與肉湯比例要大于1∶10。檢查這些調(diào)味品按三,10A描述的方法進行,保持推薦的樣品與肉湯的比例。

11、糖果與糖衣(包括巧克力):

  無菌操作稱取25g樣品放入滅菌的攪拌容器中。加入225mL滅菌的調(diào)配脫脂乳粉,攪拌2分鐘。再無菌操作轉(zhuǎn)移攪拌過的混合物到滅菌帶螺旋帽的500mL廣口瓶中或其他合適的容器內(nèi)。蓋緊瓶蓋在室溫下靜置60分鐘。轉(zhuǎn)動混勻,用試紙測定pH值。必要時調(diào)節(jié)pH值至6.8±0.2。再加入0.45mL1%煌綠染液混勻,將瓶蓋旋松1/4轉(zhuǎn)后培養(yǎng)。以下按四,1�10節(jié)進行。

12、椰子:

  無菌操作稱取25g樣品放入滅菌的帶螺旋帽的500mL廣口瓶中或其他合適的容器內(nèi)。加入225mL滅菌的乳糖肉湯,振搖后,蓋緊瓶蓋在室溫下靜置60分鐘,再振搖使其充分混勻,用試紙測定pH值。必要時調(diào)節(jié)pH值至6.8±0.2。總計加入2.25mL已蒸過(15分鐘)的陰離子特吉托爾7號,并充分混勻?捎靡颜暨^(15分鐘)的三硝基甲苯X�100來代替。這些表面活性劑限制使用最小量,使之剛剛起泡沫即可。三硝基甲苯X�100大約2或3滴。旋松瓶蓋約1/4轉(zhuǎn)后,置35℃培養(yǎng)24±2小時。以下步驟按四,1-10繼續(xù)。

13、食用染料與食用色素:

 pH6.0或以上的染料(10%懸浮液),按上述干全蛋方法(C�1)處理。沉淀染料或pH低于6.0的染料,無菌操作稱取25g樣品,放入滅菌的帶螺旋帽的500mL廣口瓶中或其他合適的容器內(nèi)。加入225mL不含煌綠染料的四硫磺酸鹽肉湯混勻。蓋緊瓶蓋在室溫下靜置60分鐘,用pH計調(diào)節(jié)pH值至6.8±0.2。再加入2.25mL0.1%的煌綠溶液,充分旋動混勻。旋松瓶蓋約1/4轉(zhuǎn)后,置35℃培養(yǎng)24±2小時。接下去按下面的四,3�10節(jié)進行。

14、明膠:

  無菌操作稱取25g樣品,放入滅菌的帶螺旋帽的500mL廣口瓶中或其他合適的容器內(nèi)。加入225mL滅菌的乳糖肉湯和5mL5%明膠酶水溶液;旌暇鶆颍w緊瓶蓋在室溫下靜置60分鐘。轉(zhuǎn)動混勻,用試紙測定pH值。必要時調(diào)節(jié)pH值至6.8±0.2。將瓶蓋旋松1/4轉(zhuǎn),置35℃培養(yǎng)24±2小時。以下按四,1�10節(jié)進行。

15、肉、肉代用品、肉副產(chǎn)品、動物產(chǎn)品、腺體制品和粗粉(魚,肉,骨):

  無菌操作稱取25g樣品放入滅菌的攪拌器中。加入225mL滅菌的乳糖肉湯,攪拌2分鐘。再無菌操作轉(zhuǎn)移已攪拌的混合物到滅菌的帶螺旋帽的500mL廣口瓶中或其他合適的容器內(nèi)。蓋緊瓶蓋在室溫下靜置60分鐘。如果混合物為粉狀,研磨過或已粉碎的,則不用攪拌。不需要攪拌的樣品,加入乳糖肉湯,并充分混勻;蓋緊瓶蓋在室溫下靜置60分鐘。旋動使充分混勻,用試紙測定pH值。必要時調(diào)節(jié)pH值至6.8±0.2?傆嫾尤2.25mL已蒸過(15分鐘)的特吉托爾陰離子7號,混勻。也可用已蒸過(15分鐘)的三硝基甲苯X�100來代替?刂剖褂眠@些表面活性劑劑量,剛剛起泡沫即可。實際用量取決于試驗材料的成分;分析粉狀腺體制品,不需要用表面活性劑。將瓶蓋旋松1/4轉(zhuǎn)后,將樣品混合物置35℃培養(yǎng)24±2小時。以下按四,1�10節(jié)進行。

16、田雞腿(此方法用于國內(nèi)的和國外的所有田雞腿檢驗):

  將15對田雞腿放入滅菌塑料袋內(nèi),并用滅菌乳糖肉湯浸沒。如果單個腿估計平均重在25g或以上,則只需檢查15對的每對中的一條腿。把袋放入大塑料燒杯內(nèi)或其它合適的容器中,在機械蕩器上震蕩15min,以4cm(1-1/2in)機械振蕩100次/分鐘。從袋中傾倒出乳糖肉湯于另一個滅菌塑料袋內(nèi)。加更多的乳糖肉湯,使總量為3500mL。充分混勻,于室溫下靜置60分鐘。必要時調(diào)節(jié)pH值至6.8±0.2。再把裝有乳糖肉湯的塑料袋放入塑料燒杯或其它合適的容器內(nèi),于35℃培養(yǎng)24±2小時。接下去按下面的四,1�10節(jié)進行。

17、野兔骨架(此方法用于國內(nèi)的和國外的所有的野兔骨架):

  取3只野兔骨架放入滅菌塑料袋內(nèi),并用滅菌乳糖肉湯浸沒(見上述A,23�25節(jié)),把袋放入大塑料燒杯內(nèi)或其它合適的容器中,在機械震蕩器上以4cm(1-1/2in)幅度振蕩100次/分鐘,震蕩15min。從袋中傾倒出乳糖肉湯混合物于另一個滅菌塑料袋內(nèi),加更多的乳糖肉湯,使總量為3500mL。充分混勻,于室溫靜置60分鐘。必要時用pH試紙調(diào)置6.8±0.2,于35℃培養(yǎng)24±2小時。接下去按下面的四,1�10節(jié)進行。

18、口香糖:

  無菌操作稱取25g樣品到滅菌燒杯(250mL)或其他合適容器中。制備過濾除菌的1.0%纖維素酶溶液(加1g纖維素酶到99mL無菌水中),用0.45um膜過濾除菌,置于150mL瓶中。(纖維素酶溶液在2·-5℃可保存最長2周時間)。加入225mL無菌乳糖肉湯和2.25mL無菌1%纖維素酶溶液于500mL無菌帶螺旋蓋的廣口瓶或其他合適容器。用磁力攪拌器劇烈攪拌酶/肉湯混合物時,通過無菌玻璃漏斗迅速倒入25g待檢樣品。旋好瓶蓋,室溫下靜置60分鐘,無須調(diào)pH值。旋松瓶蓋,35℃培養(yǎng)24±2小時。以下按四進行。

四、沙門氏菌的分離

  1、擰緊瓶蓋并輕輕振蕩培養(yǎng)過的樣品混合物。

  生鮮食物、嚴(yán)重污染的食品和動物飼料:

  轉(zhuǎn)移0.1mL混合物到10mLRAPPAPORT�VASSILIADIS(RV)肉湯培養(yǎng)基中,另轉(zhuǎn)移1mL混合物到10mL四硫磺酸鹽肉湯(TT)中。

  其它食品:

  轉(zhuǎn)移1mL混合物到10mL亞硒酸鹽胱氨酸肉湯(SC)中,另轉(zhuǎn)移1mL混合物到10mL四硫磺酸鹽肉湯(TT)中。

  2、選擇性增菌按如下步驟進行:

  生鮮食品、嚴(yán)重污染的食品和動物飼料:

  RV培養(yǎng)基在42±0.2℃(水溶)中培養(yǎng)24±2小時。TT肉湯在43±0.2℃(水溶)中培養(yǎng)24±2小時。

  其它食品:

  SC和TT肉湯在35℃培養(yǎng)24±2小時。

  3、混合均勻(如果是試管,渦旋式混合),用3mm直徑的接種環(huán),滿環(huán)(10μl)劃線接種TT肉湯于亞硫酸鉍(BS)瓊脂,木糖賴氨酸去氧膽酸鹽(XLD)瓊脂和HEKTOEN氏腸道菌(HE)瓊脂平板上。BS瓊脂平板于劃線接種的前一天制備好儲存在室溫暗處。

  4、再用3mm直徑的接種環(huán), 從RV培養(yǎng)基(樣品為生鮮食物,嚴(yán)重污染的食品和動物飼料)和SC肉湯(除了生鮮食物,嚴(yán)重污染的食品和動物飼料以外其它樣品)取滿環(huán)(10μl),劃線接種于上述平板上。

  5、把選擇性平板置35℃培養(yǎng)24±2小時。

  6、檢查平板中可疑沙門氏菌菌落的存在。

  典型的沙門氏菌菌落形態(tài):

  從每個經(jīng)過24±2小時培養(yǎng)后選擇性平板上挑 取2個或更多個菌落。典型的沙門氏菌菌落如下:

  A、在HEKTOEN氏腸道菌(HE)瓊脂上。

  菌落呈蘭綠至蘭色,帶或不帶黑色中心。許多沙門氏菌培養(yǎng)物可呈現(xiàn)大的光澤黑色中心或幾乎全部黑色的菌落。

  B、在木糖賴氨酸去氧膽酸鹽(XLD)瓊脂上。

  粉色菌落,帶或不帶黑色中心。許多沙門氏菌培養(yǎng)物可有大的光澤黑色中心或呈幾乎全部黑色的菌落。

  C、亞硫酸鉍(BS)瓊脂上。

  呈褐色,灰色或黑色,有時帶有金屬光澤。菌落周圍的培養(yǎng)基通常開始呈褐色,但伴隨培養(yǎng)時間的延長而變?yōu)楹谏,并有所謂的暈環(huán)效應(yīng)。

  如果典型菌落出現(xiàn)在經(jīng)24±2小時培養(yǎng)后的BS瓊脂上,則挑取2個或更多個典型菌落。不論BS瓊脂平板在培養(yǎng)24±2小時時是否挑取過菌落,BS平板再培養(yǎng)24±2小時。培養(yǎng)了48±2小時后,如果BS平板上出現(xiàn)典型菌,則挑取2個或更多個菌落,如果只在經(jīng)過24±2小時培養(yǎng)的BS平板上挑取了菌落,接種到三糖鐵瓊脂(TSI)和賴氨酸瓊脂(LIA)上,會呈現(xiàn)非典型反應(yīng)以至視為培養(yǎng)物中不存在沙門氏菌 。參見下面四.8部分和四.9部分,有關(guān)TSI和LIA反應(yīng)的詳細描述。

  非典型的沙門氏菌菌落形態(tài):

  不存在典型的或可疑的沙門氏菌菌落時,按如下步驟檢驗非典型的沙門氏菌菌落。

  A、HE和XLD瓊脂:

  非典型的沙門氏菌在HE和XLD瓊脂上呈黃色菌落,帶或不帶黑色中心。HE和XLD平板經(jīng)24±2小時培養(yǎng)后,沒有典型的沙門氏菌菌落,則挑取2個或更多個非典型的沙門氏菌菌落。

  B、BS瓊脂:

  某些非典型菌株產(chǎn)生綠色菌落,其周圍培養(yǎng)基稍微或不呈暗色。如果BS平板培養(yǎng)24±2小時后,沒有出現(xiàn)典型菌落,則不挑取任何菌落,讓平板繼續(xù)培養(yǎng)24±2小時。如果經(jīng)48±2小時培養(yǎng)后,仍沒有典型或可疑的菌落出現(xiàn),則挑取2個或更多個非典型的菌落。

  7、用滅菌接種針輕輕地接觸每個菌落中心部位,接種TSI斜面,先在斜面上劃線,再于底層穿刺。不需灼燒接種針,即可接種LIA斜面,先穿刺接種底層兩次,再劃線斜面上。由于賴氨酸脫羧反應(yīng)需嚴(yán)格厭氧條件,因而LIA斜面必須有深的底層(4cm)。將已挑過菌落的選擇性平板于5�8℃儲存。

  8、將TSI和LIA瓊脂斜面于35℃分別培養(yǎng)24±2小時。當(dāng)進行斜面培養(yǎng)時放松試管帽以保持需氧條件,以防止過量的H2S產(chǎn)生。

  在TSI瓊脂中,典型的沙門氏菌培養(yǎng)物使斜面呈堿性(紅色),底層呈酸性(黃色),產(chǎn)生或不產(chǎn)生H2S(瓊脂變黑色)。在LIA瓊脂中,典型的沙門氏菌培養(yǎng)物其試管底層呈堿性(紫色)反應(yīng)。只有試管底層呈明顯黃色時才認(rèn)為有酸性(陰性)反應(yīng)。不要單純根據(jù)其試管底層產(chǎn)生的褪色反應(yīng)就排除它。在LIA中,大多數(shù)沙門氏菌培養(yǎng)物皆產(chǎn)生H2S;一些非沙門氏菌培養(yǎng)物產(chǎn)生磚紅色反應(yīng)。

  9、在LIA瓊脂上所有底層呈堿性反應(yīng)的培養(yǎng)物,無論其在TSI瓊脂上反應(yīng)如何,皆應(yīng)全部保留為可疑的沙門氏菌分離物,并進一步做生化和血清學(xué)試驗。在LIA中呈酸性底層反應(yīng)和在TSI中呈斜面堿性,底層酸性的培養(yǎng)物,均視為可疑的沙門氏菌分離物,應(yīng)進一步做生化和血清學(xué)試驗。在LIA中呈酸性底層和在TSI中呈酸性斜面和酸性底層的培養(yǎng)物,可視為非沙門氏菌培養(yǎng)物而棄去。對所保留的擬定陽性TIS瓊脂培養(yǎng)物,可按下面四,10節(jié)敘述的進行檢測,是否為沙門氏菌,包括亞利桑那沙門氏菌。如果TSI中培養(yǎng)物沒有呈現(xiàn)沙門氏菌的典型反應(yīng)(斜面堿性,底層酸性),再從未擬定陽性的選擇性平板上另外挑取可疑菌落,象上面四,7節(jié)所述的接種TSI和LIA斜面。

  10、生化和血清學(xué)鑒定試驗:

  a從亞硒酸鹽胱氨酸肉湯(或相應(yīng)食品的RV培養(yǎng)基)劃線分離的選擇性瓊脂平板上所挑取的3個擬定陽性TSI瓊脂培養(yǎng)物和從四硫磺酸鹽肉湯劃線分離的選擇性平板所挑取的3個擬定陽性TSI瓊脂培養(yǎng)物,進行生化和血清學(xué)鑒定試驗。

  b如從一組選擇性瓊脂平板未分離出3個擬定陽性的TSI瓊脂培養(yǎng)物,則對其它已分離到的擬定陽性的TSI瓊脂培養(yǎng)物進行生化和血清學(xué)鑒定試驗。對所分析的每個25g樣品,至少應(yīng)檢查6個TSI培養(yǎng)物。

五、沙門氏菌的鑒定:

  1、混雜培養(yǎng)物:

  對呈混雜菌的TSI瓊脂培養(yǎng)物,皆應(yīng)劃線接種于麥康凱(MC)瓊脂,HE瓊脂,或木糖賴氨酸去氧膽酸鹽(XLD)瓊脂上,于35℃培養(yǎng)24±2小時。檢查平板上可疑沙門氏菌存在與否。

  a、在麥康凱(MC)瓊脂上:

  典型菌落呈透明、無色,有時帶有暗色中心。沙門氏菌菌落有時可使培養(yǎng)基中其它細菌所造成的膽鹽沉淀區(qū)透明。

  b、在Hektoen氏腸道菌(HE)瓊脂上:見上述四,6a。

  c、在木糖賴氨酸去氧膽酸鹽(XLD)瓊脂上:見上述四,6b。

  按上面的四,6節(jié)所述轉(zhuǎn)種至少2個可疑沙門氏菌菌落到TSI瓊脂和LIA瓊脂斜面上,接下去按上述的四,8節(jié)進行鑒定。

  2、純培養(yǎng)物:

  a、尿素酶試驗(常規(guī))。由每個擬定陽性TSI瓊脂斜面培養(yǎng)物,用滅菌針分別接種生長物到每個尿素肉湯試管中。偶爾也會有未接種的尿素肉湯管變紫紅色(試驗陽性),因而應(yīng)包括未接種該肉湯管作為對照,于35℃培養(yǎng)24±2小時。

  b、可選的尿素酶試驗(快速法)。用3mm直徑接種環(huán),自每一擬定陽性的TSI瓊脂斜面培養(yǎng)物中取2環(huán)轉(zhuǎn)種到快速尿素肉湯管中,37±0.5℃水浴中培養(yǎng)2小時。棄去所有呈陽性結(jié)果的培養(yǎng)物,保留所有陰性反應(yīng)的(培養(yǎng)基不變色)培養(yǎng)物,為進一步研究試驗用。

  3、血清學(xué)多價鞭毛(H)試驗:

  a、此時或以后進行多價鞭毛(H)試驗,可按下面五,4節(jié)所述進行。從每個尿素酶陰性的TSI瓊脂斜面培養(yǎng)物接種到以下任一項, 1)腦心浸液肉湯,于35℃培養(yǎng)4�6小時,直到可見的生長物出現(xiàn)(供當(dāng)日試驗用),或2)胰胳胨大豆肉湯,于35℃培養(yǎng)24±2小時(供次日試驗用)。在各5mL肉湯培養(yǎng)物中加2.5mL甲醛生理鹽水溶液。

  b、選兩個以甲醛處理的肉湯培養(yǎng)物同沙門氏菌多價鞭毛(H)抗血清試驗。在10×75mm或13×100mm血清學(xué)試管內(nèi),加入0.5mL經(jīng)合適稀釋的沙門氏菌多價鞭毛(H)抗血清,再加入0.5mL待測抗原進行試驗。并以0.5mL甲醛生理鹽水溶液同0.5mL甲醛處理的抗原混合好,制成鹽水對照,將各混合物于48�50℃水浴培養(yǎng),每隔15分鐘觀察一次初步結(jié)果,并于1小時讀數(shù)最終結(jié)果。

  陽性反應(yīng):在甲醛肉湯培養(yǎng)物與血清混合物中凝集,而在甲醛肉湯培養(yǎng)物與甲醛鹽水管中(對照管)不凝集。

  陰性反應(yīng):在甲醛肉湯培養(yǎng)物與血清混合物中(試驗混合物)不凝集,在對照管中也不凝集。

  非特異反應(yīng):在試驗混合物與對照管中皆出現(xiàn)凝集。對出現(xiàn)這類結(jié)果的培養(yǎng)物,需用“Spicer Edwars”氏抗血清做進一步試驗。

  4、尿素酶陰性培養(yǎng)物試驗:

  a、賴氨酸脫羧酶肉湯。如果所做的LIA試驗是滿意的,則不需重復(fù)試驗。如果培養(yǎng)物呈現(xiàn)可疑的LIA反應(yīng),則以賴氨酸脫羧酶肉湯進行賴氨酸脫羧酶的最終鑒定。將少量可疑沙門氏菌陽性TSI瓊脂斜面培養(yǎng)物接種至賴氨酸脫羧酶肉湯管。將試管帽旋緊,置于35℃培養(yǎng)48±2小時,至少每隔24小時檢查一次。沙門氏菌因堿性反應(yīng),則使整個培養(yǎng)基呈紫色。陰性反應(yīng)則使整個培養(yǎng)基呈黃色。如果培養(yǎng)基出現(xiàn)褪色現(xiàn)象(即不呈紫色也不呈黃色),可加入幾滴0.2%溴甲酚紫溶液,然后再觀察試管的反應(yīng)。

  b、酚紅衛(wèi)茅醇肉湯或含有0.5%衛(wèi)茅醇的紫色肉湯基礎(chǔ)液。由TSI瓊脂上取少量培養(yǎng)物接種至肉湯管中。將試管帽放松。置于35℃培養(yǎng)48±2小時,但24h后觀察反應(yīng)。大多數(shù)沙門氏菌呈陽性實驗結(jié)果,表現(xiàn)為內(nèi)部發(fā)酵管中產(chǎn)氣和培養(yǎng)基變酸(黃色)。產(chǎn)酸為陽性反應(yīng)。陰性反應(yīng)為倒管內(nèi)無氣體產(chǎn)生。整個培養(yǎng)基呈紅色(有酚紅指示劑)或紫色(有溴甲酚紫指示劑)。

  c、胰蛋白胨(或色氨酸)肉湯。將少量TSI瓊脂培養(yǎng)物接種到肉湯管中,置35℃培養(yǎng)24±2小時,并按以下進行試驗。

  1)氰化鉀(KCN)肉湯。

  從24h色氨酸培養(yǎng)物移取3mm接種環(huán)一環(huán)轉(zhuǎn)種到KCN肉湯管中。將管口加熱,以便加塞時蠟封良好。35℃培養(yǎng)48±2小時,但24h后觀察反應(yīng)。有生長者(有渾濁)為陽性。大多數(shù)沙門氏菌在此培養(yǎng)基中不能生長,即無渾濁現(xiàn)象。

  2)丙二酸鹽肉湯:

  用3mm接種環(huán)移取24h色氨酸肉湯培養(yǎng)物,轉(zhuǎn)種到丙二酸鹽肉湯管中。因偶爾會出現(xiàn)未接種的丙二酸鹽肉湯在存放期間變蘭(陽性反應(yīng)),所以應(yīng)有未接種的丙二酸鹽肉湯管作對照。35℃培養(yǎng)48±2小時,但在培養(yǎng)24h后觀察反應(yīng)。大多數(shù)沙門氏菌培養(yǎng)物在此肉湯中為陰性反應(yīng)(綠色或不變色)。

  3)吲哚試驗:

  轉(zhuǎn)種5mL24h色氨酸肉湯培養(yǎng)物到空試管中,加入0.2-0.3mLKovacs氏試劑,大多數(shù)沙門氏菌培養(yǎng)物為陰性反應(yīng)(在肉湯表面無深紅色)。并記錄呈桔色和粉色變化的中間型為±反應(yīng)。

  4)沙門氏菌血清學(xué)鞭毛(H)試驗:

  如果未做多價鞭毛(H)試驗或Spicer-Edwards氏鞭毛(H)試驗,可任選其一。

  5)吲哚試驗陽性和血清學(xué)鞭毛(H)試驗陰性;或者KCN試驗陽性和賴氨酸脫羧酶試驗陰性的非沙門氏菌任一培養(yǎng)物予以去除。

  5、沙門氏菌血清學(xué)菌體(O)試驗。(用已知沙門氏菌培養(yǎng)物同所有抗血清做予試驗)。

  a、多價菌體(O)試驗:

  用蠟筆在每個玻璃或塑料平板(15×100mm)內(nèi)側(cè)劃出2個約1×2cm的區(qū)域?墒褂蒙唐坊姆謪^(qū)載玻片,用2mL0.85%生理鹽水乳化從24-48hTSI斜面或者更好是胰胨血瓊脂基礎(chǔ)(無血),用3mm接種環(huán)移取培養(yǎng)物。加1滴菌懸液于用蠟筆標(biāo)出的每一矩形區(qū)域的上部。這一區(qū)域的下部加1滴生理鹽水。在另一區(qū)域加1滴沙門氏菌多價菌體(O)抗血清。再以干凈滅菌的接種環(huán)或針將一個區(qū)域內(nèi)的菌懸液和生理鹽水混合。在另一區(qū)域內(nèi)菌懸液和抗血清液混合。將混合液前后傾斜移動1min,并在良好照明下對著黑暗背景觀察,任何程度的凝集都視為陽性反應(yīng)。多價菌體(O)試驗結(jié)果分類如下:

  陽性反應(yīng):混合物試驗?zāi),而在鹽水對照中不凝集。

  陰性反應(yīng):混合物試驗不凝集,在鹽水對照中也不凝集。

  非特異性反應(yīng):混合物試驗和鹽水對照中皆凝集,需按Edwards和Ewing氏的腸桿菌科鑒定中所描述的進一步作生化學(xué)和血清學(xué)試驗。

  b、菌體(O)群試驗

  如有各群菌體(O)抗血清,包括Vi,代替沙門氏菌多價菌體(O)抗血清,按上述五,5a試驗。對Vi凝集反應(yīng)陽性的可參照官方分析分析方法的967.28B部分專門處理這些培養(yǎng)物。與菌體(O)群抗血清呈陽性凝集的培養(yǎng)物,作該菌體(O)群陽性記錄;不能與菌體(O)群抗血清發(fā)生反應(yīng)者,做該菌體(O)群試驗陰性記錄。

  6、補充生化試驗

  按表1中1-11項試驗,對培養(yǎng)物呈典型沙門氏菌反應(yīng)者,進行沙門氏菌分類。如在25g分析樣品中有一個TSI培養(yǎng)物被劃為沙門氏菌,則該25g分析樣品的其他TSI培養(yǎng)物就無需進一步試驗。沙門氏菌鞭毛(H)試驗陽性表明有沙門氏菌抗原,但不具有沙門氏菌生化特性者,應(yīng)對培養(yǎng)物作純分離(按上述五、1),按上述五、2開始重新做試驗。

  對表1中1-11項目,不呈典型沙門氏菌反應(yīng)的培養(yǎng)物做以下補充試驗以最終判斷為非沙門氏菌。

  a、酚紅乳糖肉湯或紫色乳糖肉湯。

  1)從每個尚未分類的24-48hTSI瓊脂斜面上挑取少許培養(yǎng)物,接種到肉湯管中,35℃培養(yǎng)48±2h。并在24h后開始觀察變化。

  陽性反應(yīng):產(chǎn)酸(黃色)和在倒立發(fā)酵管內(nèi)產(chǎn)氣。只要產(chǎn)酸就視為陽性反應(yīng)。大多數(shù)沙門氏菌為陰性結(jié)果。即在倒立發(fā)酵管內(nèi)沒有氣體形成,和整個培養(yǎng)基呈紅色(含酚紅指示劑)或紫色(含溴甲酚紫指示劑)。

  2)除培養(yǎng)物在TSI瓊脂斜面上產(chǎn)酸和在LIA中呈陽性反應(yīng),或丙二酸鹽肉湯試驗呈陽性的培養(yǎng)物外,棄去乳糖試驗陽性的非沙門氏菌培養(yǎng)物。為了證明他們是否為亞利桑那菌,需對這些培養(yǎng)物作進一步試驗。

  b、酚紅蔗糖肉湯或紫色蔗糖肉湯。

  按上述五,6a-1所敘述的程序進行,除那些培養(yǎng)物在TSI瓊脂斜面上產(chǎn)酸和在LIA中呈陽性反應(yīng)者外,呈蔗糖試驗陽性結(jié)果者皆作為非沙門氏菌棄去。

  c、MR-VP肉湯。

  對每個未分類的TSI瓊脂斜面上可疑沙門氏菌培養(yǎng)物,挑取少許,接種到此肉湯管中,置于35℃培養(yǎng)48±2h。

  1)在室溫下按下述進行Voges-Proskauer氏(VP)試驗:

  移取1mL48h培養(yǎng)物于試管中,并將剩余的MR-VP肉湯于35℃再培養(yǎng)48h。加入0.6mLα-萘酚溶液于試管中并振搖;加40%KOH溶液0.2mL,并振搖。為了加快反應(yīng)速度,加少許肌酸結(jié)晶。4h后觀察結(jié)果:陽性反應(yīng)為整個培養(yǎng)基由粉紅色轉(zhuǎn)變至紅寶石色。絕大多數(shù)沙門氏菌VP試驗陰性,即整個肉湯不呈粉紅至紅色變化。

  2)甲基紅試驗:

  吸取經(jīng)96h培養(yǎng)的MR-VP肉湯5mL于試管中,加入5-6滴甲基紅指示劑,立即觀察結(jié)果。絕大多數(shù)沙門氏菌培養(yǎng)物呈陽性結(jié)果,即培養(yǎng)基呈彌散性紅色。明顯的黃色為陰性結(jié)果。對KCN陽性,V-P試驗陽性及甲基紅試驗為陰性培養(yǎng)物,皆可作為非沙門氏菌棄去。

  d、Simmons氏枸櫞酸鹽瓊脂:

  從未分類的TSI瓊脂斜面上,用接種針沾取培養(yǎng)物,劃線接種于枸櫞酸鹽瓊脂斜面上,并穿刺底層。置于35℃培養(yǎng)96±2h,按下述方法讀取結(jié)果。

  陽性反應(yīng):能生長,通常伴隨顏色由綠色變蘭色。大多數(shù)沙門氏菌培養(yǎng)物為枸櫞酸鹽陽性。

  陰性反應(yīng):不生長或微弱生長,而且不變色。

  7、培養(yǎng)物的分類:

  沙門氏菌培養(yǎng)物應(yīng)具有表1反應(yīng)模式。凡培養(yǎng)物具有表2所列任何一小項結(jié)果,為非沙門氏菌則棄去。對任何培養(yǎng)物,當(dāng)不能按表1的分類表,明確地鑒定為非沙門氏菌屬,或也不能根據(jù)表2所列試驗反應(yīng)從沙門氏菌屬中排除者,可按Edwards和Ewings氏的“腸桿菌科鑒定”所述的補充試驗進一步分類。

  如2個TSI培養(yǎng)物皆不能按生化試驗證實分離物為沙門氏菌時,則對同一個25g檢驗樣品中保留的尿素酶陰性TSI培養(yǎng)物,按五,4開始進行生化學(xué)試驗。

  8、沙門氏菌屬的擬定性鑒定。

  使用5種商品化的生物化學(xué)試劑盒(API 20E, Enterotube II, Enterobacter aceae II, MICRO-ID,或Vitek GNI)中任一種,代替常規(guī)的生化管系統(tǒng),鑒定擬定食源性沙門氏菌屬。按本節(jié)鑒定所述,檢驗人員根據(jù)自己試驗室選擇商品試劑盒與生化管系統(tǒng)相適應(yīng)的一種商品試劑盒。生化學(xué)商品試劑盒不能用來代替血清學(xué)試驗(1)。組裝試劑盒,配制試劑盒所需試劑。參照官方分析方法的978.24部分(API-20E, Enterotube II和Enterobacterlaceae II),989.12部分(MICRO-ID),和991.13部分(Vitek GNI),接種于每個組合,并按規(guī)定的時間與溫度進行培養(yǎng)。加試劑,觀察與記錄結(jié)果。參照上述Ref.1把培養(yǎng)物擬定為沙門氏菌或非沙門氏菌屬!

  為證實擬定為沙門氏菌的培養(yǎng)物,尚需進行沙門氏菌菌體(O)血清學(xué)試驗,按上述五,5;和沙門氏菌鞭毛(H)血清試驗,按上述五,3;或進行Spicer-Edwards氏鞭毛(H)試驗。并按下列原則對培養(yǎng)物進行分類:

  a、用商品化試劑盒擬定為沙門氏菌的培養(yǎng)物,若沙門氏菌菌體(O)血清學(xué)試驗陽性與沙門氏菌鞭毛(H)血清學(xué)試驗陽性的則報告為沙門氏菌。

  b、用商品化試劑盒確定為非沙門氏菌的培養(yǎng)物,參照AOAC標(biāo)準(zhǔn)(1)確定亦為非沙門氏菌,應(yīng)作非沙門氏菌予以排除。

  c、凡不符合a或b的培養(yǎng)物,應(yīng)按上述五,2-6項中有關(guān)規(guī)定作進一步試驗,或按Ewing(2)氏的有關(guān)項目進一步試驗,或送至標(biāo)準(zhǔn)定型實驗室,做最后的血清定型與鑒定。

  9、鞭毛(H)試驗陰性培養(yǎng)物的處理:

  對一些生化反應(yīng)典型,被認(rèn)為是沙門氏菌,但鞭毛(H)試驗陰性的培養(yǎng)物,可能是無動力的菌株,或鞭毛抗原發(fā)育不充分,對此培養(yǎng)物的動力測定方法如下:

  從TSI斜面上挑取少量的培養(yǎng)物,接種于動力試驗培養(yǎng)基平板中,在距平板邊緣10mm處一次穿刺2-3mm深,不要刺到平板底或接種到其他任何部位。置于35℃培養(yǎng)24h。如果細菌游散生長至40mm或更遠,按下述方法再試驗:在游散生長最遠處,用3mm接種環(huán)轉(zhuǎn)種一環(huán)培養(yǎng)物至胰酪胨大豆蛋白胨肉湯中。重復(fù)沙門氏菌多價鞭毛(H)(按上述五,3)或作Spicer-Edwards氏鞭毛(H)血清學(xué)試驗。如果培養(yǎng)物經(jīng)第一個24h培養(yǎng)后無動力,于35℃培養(yǎng)24h;如果仍無動力,則置25℃再培養(yǎng)5天。如果上述試驗仍為陰性,把該培養(yǎng)物定為無動力菌株。如果鞭毛(H)陰性培養(yǎng)物,按生化學(xué)反應(yīng)可疑為沙門氏菌,應(yīng)將培養(yǎng)物呈送微生物學(xué)實驗室作進一步的鑒定和/或血清學(xué)分型。遞送血清學(xué)定型培養(yǎng)物,除非另有說明,每個檢驗樣品要遞送兩個分離物。培養(yǎng)物要放在腦心浸液瓊脂斜面的試管內(nèi)遞送。試管的螺旋帽應(yīng)擰緊以確保安全。

六、控制:

  嚴(yán)格執(zhí)行食品生產(chǎn)良好操作程序,注意滅蠅,加強對飲水、食品等的衛(wèi)生監(jiān)督管理,以切斷傳染途徑。對食品加工和飲食服務(wù)人員定期進行健康檢查,及時發(fā)現(xiàn)帶菌者并給以治療或調(diào)離工作崗位。加強屠宰業(yè)的衛(wèi)生監(jiān)督及各種食品特別是肉類運輸、加工、冷藏等方面的衛(wèi)生措施,防止沙門氏菌污染。

  在食品加工過程中,必須嚴(yán)格按衛(wèi)生規(guī)范防止二次污染,通過蒸煮、巴氏消毒、存放適宜溫度等進行控制,都能防止沙門氏菌病的發(fā)生。

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