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革蘭氏陽性細(xì)菌的轉(zhuǎn)化

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2011-05-20  來源:丁香通
核心提示: 革蘭氏陽性細(xì)菌的轉(zhuǎn)化

 
一、革蘭氏陽性細(xì)菌,轉(zhuǎn)化過程的幾個(gè)階段:
 
1.細(xì)菌感受態(tài)的形成
 
由于分泌一種稱為感受態(tài)因子的小蛋白而導(dǎo)致細(xì)菌感受態(tài)的形成。
 
2.轉(zhuǎn)化因子的吸收
 
雙鏈DNA片段與感受態(tài)受體菌的細(xì)胞表面特定位點(diǎn)結(jié)合,并激活臨近的核酸酶。DNA雙鏈中的一條單鏈逐步降解,同時(shí)另一條單鏈逐步進(jìn)入細(xì)胞。
 
3.整合復(fù)合物前體的形成
 
一種特殊蛋白與單鏈DNA結(jié)合,有效保護(hù)單鏈DNA免遭核酸酶的降解,并將其引導(dǎo)至受體菌染色體DNA處。
 
4.單鏈DNA轉(zhuǎn)化因子的整合
 
轉(zhuǎn)化DNA單鏈可以通過同源重組,置換受體細(xì)胞染色體DNA的同源區(qū),形成異源雜合雙鏈DNA結(jié)構(gòu)。
 
5.轉(zhuǎn)化子的形成
 
受體菌染色體組進(jìn)行復(fù)制,雜合區(qū)段亦半保留復(fù)制,當(dāng)細(xì)胞分裂后,此染色體發(fā)生分離,于是新形成一個(gè)轉(zhuǎn)化子。
 
二、影響轉(zhuǎn)化的因素
 
1.DNA能否進(jìn)入細(xì)胞;
 
2.DNA進(jìn)入細(xì)胞后的穩(wěn)定性;
 
3.質(zhì)粒DNA的大小,大質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化效率低于小質(zhì)粒,到目前,大于30kb的質(zhì)粒,轉(zhuǎn)化效率仍很低;
 
4.DNA的濃度、純度和形狀;
 
5.誘導(dǎo)感受態(tài)細(xì)菌所用的離子的種類和濃度;
 
6.熱休克時(shí)間的長短及平板培養(yǎng)條件等。 
 
編輯:songjiajie2010

 
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關(guān)鍵詞: 革蘭氏陽性菌 轉(zhuǎn)化
 

 
 
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