進(jìn)行定量檢測(cè)時(shí),必須先用滅菌取樣框(塑料或不銹鋼等)確定被測(cè)試的區(qū)域。
棉花-羊毛拭子:用干燥的棉花-羊毛纏在長(zhǎng)4cm,直徑1cm~1.5cm的木棒或不銹鋼絲上做成棉花-羊毛拭子。然后將拭子放在試管中,蓋上蓋子后滅菌。取樣時(shí)先將拭子在稀釋液中浸濕,然后在待測(cè)樣品的表面緩慢旋轉(zhuǎn)拭子平行用力涂抹兩次。涂抹的過(guò)程中應(yīng)保證拭子在取樣框內(nèi)。取樣后拭子重新放回裝有10ml取樣溶液的試管中。
藻酸鹽棉拭子:由海藻酸鈣羊毛制成。將海造酸鹽羊毛纏在直徑為1.5mm的木棒上做成長(zhǎng)1cm~1.5cm、直徑7mm的拭子頭,滅菌后放入試管中。取樣步驟同①。取樣后放入裝有10ml的1+4Ringer氏溶液(含1%偏磷酸六納)的試管中。
② 淋洗法
用10倍于樣品的滅菌稀釋液(質(zhì)量比)對(duì)樣品進(jìn)行淋洗,得到1:10的樣品原液,這種取樣方法可適用于全禽、干果、蔬菜等食品。報(bào)告結(jié)果時(shí),應(yīng)注明該結(jié)果僅代表樣品表面的細(xì)菌總數(shù)。
③膠帶法
這種取樣方法要用到不干膠帶或不干膠標(biāo)簽。不干膠標(biāo)簽的優(yōu)點(diǎn)是能把取樣的詳細(xì)情況寫(xiě)在標(biāo)簽的背面,取樣后貼在粘貼架上。不干膠膠帶取樣后同樣需轉(zhuǎn)接到一個(gè)無(wú)菌粘貼架上。這種方法可用于檢測(cè)食品表面和儀器、設(shè)備表面的微生物。膠帶和標(biāo)簽制成后,可用易揮發(fā)溶液進(jìn)行短時(shí)間的滅菌。必須確保滅菌后的膠帶無(wú)菌或殘留的微生物失去活性。
膠帶或標(biāo)簽的一端要向內(nèi)彎回大約1cm左右以方便使用。取樣時(shí),把膠帶從粘貼架上取下壓在待測(cè)物質(zhì)表面,迅速取樣后,重新粘回到模板上。送到實(shí)驗(yàn)室后,將膠帶(或標(biāo)簽)從粘貼架上取下,壓在所需培養(yǎng)基表面。
④瓊脂腸法
瓊脂腸有無(wú)菌圓塑料袋(或塑料筒)和加入其中的無(wú)菌瓊脂培養(yǎng)基制成。可在實(shí)驗(yàn)室制作,一些國(guó)家也有成品出售。使用時(shí),在瓊脂的末端無(wú)菌切開(kāi),將暴露的瓊脂面壓在樣品表面,用無(wú)菌解剖刀切下一薄片,放在培養(yǎng)皿上培養(yǎng)。
⑤影印盤(pán)
影印盤(pán)是一種無(wú)菌的塑料盤(pán),也可稱(chēng)為“觸盤(pán)”,可以從許多生產(chǎn)廠商處買(mǎi)到。制作時(shí)按要求在容器中央填滿足夠的瓊脂培養(yǎng)基,并形成凸?fàn)蠲,需要時(shí),將瓊脂表面壓在待測(cè)物表面。取樣后再放入適當(dāng)?shù)臏囟扰囵B(yǎng)。
⑥觸片法
用一個(gè)無(wú)菌玻片觸壓食品表面,帶回實(shí)驗(yàn)室。固定染色(如革蘭氏法)后在顯微鏡下檢測(cè),也可以將取樣的玻片壓在倒有培養(yǎng)基的平板上,將細(xì)菌轉(zhuǎn)接到瓊脂表面,(用無(wú)菌鑷子)移去玻片后,培養(yǎng)平板。這種方法不能用于菌體計(jì)數(shù),但能快速判斷優(yōu)勢(shì)菌落的類(lèi)型,這對(duì)生肉、禽肉和軟奶酪等食品更為適用。
⑦表層切片法
用滅菌解剖刀或鑷子切取一薄層表層樣品。這種方法最適用于家禽皮膚的取樣。將樣品放入裝有適當(dāng)稀釋液和適當(dāng)稀釋度的容器中,均質(zhì)后得到初始濃度為10-1的樣品原液。