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微生物實驗室技術操作要求

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2021-10-11
核心提示:實驗室技術操作要求一、無菌操作要求食品微生物實驗室工作人員,必須有嚴格的無菌觀念,許多試驗要求在無菌條件下進行,主要原因
 實驗室技術操作要求
一、無菌操作要求

食品微生物實驗室工作人員,必須有嚴格的無菌觀念,許多試驗要求在無菌條件下進行,主要原因:一是防止試驗操作中人為污染樣品,二是保證工作人員安全,防止檢出的致病菌由于操作不當造成個人污染。


1.需要建立無菌室管理制度。

2.保持良好的衛(wèi)生:相對濕度40%-60%,溫度2-22℃,最好安裝空調(diào)。

3.無菌室不得進行其他工作,非操作所使用的物件一律不得放入,檢后的余樣不得存放。

4.紫外燈的使用期限一般為300小時,要記錄使用時間,到期更換。


5.接種細菌時必須穿工作服、戴工作帽。


6.進行接種食品樣品時,必須穿專用的工作服、帽及拖鞋,應放在無菌室緩沖間,工作前經(jīng)紫外線消毒后使用。


7.接種食品樣品時,應在進無菌室前用肥皂洗手,然后用75%酒精棉球?qū)⑹植粮蓛簟?/span>


8.進行接種所用的吸管,平皿及培養(yǎng)基等必須經(jīng)消毒滅菌,打開包裝未使用完的器皿,不能放置后再使用,金屬用具應高壓滅菌或用95%酒精點燃燒灼三次后使用。


9.從包裝中取出吸管時,吸管尖部不能觸及外露部位,使用吸管接種于試管或平皿時,吸管尖不得觸及試管或平皿邊。


10.接種樣品、轉(zhuǎn)種細菌必須在酒精燈前操作,接種細菌或樣品時,吸管從包裝中取出后及打開試管塞都要通過火焰消毒。


11.接種環(huán)和針在接種細菌前應經(jīng)火焰燒灼全部金屬絲,必要時還要燒到環(huán)和針與桿的連接處,接種結核菌和烈性菌的接種環(huán)應在沸水中煮沸5min,再經(jīng)火焰燒灼。


12.吸管吸取菌液或樣品時,應用相應的橡皮頭吸取,不得直接用口吸。


二、無菌間使用要求

 

1.無菌間通向外面的窗戶應為雙層玻璃,并要密封,不得隨意打開,并設有與無菌間大小相應的緩沖間及推拉門,另設有0.5-0.7m2的小窗,以備進入無菌間后傳遞物品。


2.無菌間內(nèi)應保持清潔,工作后用2%-3%煤酚皂溶液消毒,擦拭工作臺面,不得存放與實驗無關的物品。


3.無菌間使用前后應將門關緊,打開紫外燈,如采用室內(nèi)懸吊紫外燈消毒時,需30W紫外燈,距離在1.0m處,照射時間不少于30min,使用紫外燈,應注意不得直接在紫外線下操作,以免引起損傷,燈管每隔兩周需用酒精棉球輕輕擦拭,除去上面灰塵和油垢,以減少紫外線穿透的影響。


4.處理和接種食品標本時,進入無菌間操作,不得隨意出入,如需要傳遞物品,可通過小窗傳遞。


5.在無菌間內(nèi)如需要安裝空調(diào)時,則應有過濾裝置。

 

6.工作室應矮小、平整,面積小,高2.2-2.3米,內(nèi)部裝修應平整、光滑,無凹凸不平或棱角等,四壁及屋頂應用不透水之材質(zhì),便于擦洗及殺菌。

7.室內(nèi)采光面積大,從室外應能看到室內(nèi)情況。

8.為保證無菌室的潔凈,無菌室周圍需設緩沖走廊,走廊旁再設緩沖間,其面積可小于無菌室。

9.無菌室、緩沖走廊及緩沖間均設有日光燈及供消毒空氣用紫外燈,殺菌紫外燈離工作臺以1米為宜 ,其電源開關均應設在室外。

10.無菌室與緩沖間進出口應設拉門,門與窗平齊,門縫要封緊,兩門應錯開,以免空氣對流造成污染。


三、有毒有菌污物處理要求

微生物實驗所用實驗器材、培養(yǎng)物等未經(jīng)消毒處理,一律不得帶出實驗室。

1. 經(jīng)培養(yǎng)的污染材料及廢棄物應放在嚴密的容器或鐵絲筐內(nèi),并集中存放在指定地點,待統(tǒng)一進行高壓滅菌。


2. 經(jīng)微生物污染的培養(yǎng)物,必須經(jīng)121℃ 30min高壓滅菌。


3. 染菌后的吸管,使用后放入5﹪煤酚皂溶液或石炭酸液中,最少浸泡24h(消毒液體不得低于浸泡的高度)再經(jīng)121℃ 30 min高壓滅菌。


4. 涂片染色沖洗片的液體,一般可直接沖入下水道,烈性菌的沖洗液必須沖在燒杯中,經(jīng)高壓滅菌后方可倒入下水道,染色的玻片放入5﹪煤酚皂溶液中浸泡24 h后,煮沸洗滌。做凝集試驗用的玻片或平皿,必須高壓滅菌后洗滌。


5. 打碎的培養(yǎng)物,立即用5﹪煤酚皂溶液或石炭酸液噴灑和浸泡被污染部位,浸泡半小時后再擦拭干凈。污染的工作服或進行烈性試驗所穿的工作服、帽、口罩等,應放入專用消毒袋內(nèi),經(jīng)高壓滅菌后方能洗滌。

 

四、樣品采集及處理要求

1.所采集的檢驗樣品一定要具有代表性,采樣時應首先對該批食品原料、加工、運輸、貯藏方法條件、周圍環(huán)境衛(wèi)生狀況等進行詳細調(diào)查,檢查是否有污染源存在。


2.根據(jù)食品的種類及數(shù)量,采樣數(shù)量及方法應按標準檢驗方法的要求進行。


3.采樣應注意無菌操作,容器必須滅菌,避免環(huán)境中微生物污染,容器不得使用煤酚皂溶液,用新潔爾滅、酒精等消毒藥物滅菌,更不能含有此類消毒藥物或抗生素類藥物,以避免殺死樣品中的微生物,所用剪、刀、匙用具也需滅菌方可應用。


4.樣品采集后應立即送往檢驗室進行檢驗,送檢過程中一般不超過3h,如路程較遠,可保存在1-5℃環(huán)境中,如需冷凍者,則在凍存狀態(tài)下送檢。


5.檢驗室收到樣品后,進行登記(樣品名稱、送檢單位、數(shù)量、日期、編號等),觀察樣品的外觀,如果發(fā)現(xiàn)有下列情況之一者,可拒絕檢驗。

(1) 樣品經(jīng)過特殊高壓、煮沸或其他方法殺菌者,失去代表原食品檢驗意義者。

(2) 瓶、袋裝食品已啟開者,熟肉及其制品、熟禽等食品已折碎不完整者,即失去原食品形狀者(食物中毒樣品除外)。

(3) 按規(guī)定采樣數(shù)量不足者。

對送檢符合要求的樣品,檢驗室收到后,應立即進行檢驗,如果條件不具備,應置4℃冰箱存放,及時準備創(chuàng)造條件,然后進行檢驗。


6.樣品檢驗時,根據(jù)其不同性狀,進行適當處理。

(1) 液體樣品接種時,應充分混合均勻,按量吸取進行接種。

(2) 固體樣品,用滅菌刀、剪取其不同部位共25g,置于225ml滅菌生理鹽水或其他溶液中,用均質(zhì)器攪碎混勻后,按量吸取接種。

(3) 瓶、袋裝食品應用滅菌操作啟開,根據(jù)性狀選擇上述方法處理后接種。

 

五、樣品檢驗、記錄和報告的要求

1.檢驗室收到樣品后,首先進行外觀檢驗,及時按照國家標準檢驗方法進行檢驗,檢驗過程中要認真、負責、嚴格進行無菌操作,避免環(huán)境中微生物污染。


2.樣品檢驗過程中所用方法、出現(xiàn)的現(xiàn)象和結果等均要用文字寫出試驗紀錄,以作為對結果分析、判定的依據(jù),記錄要求詳細、清楚、真實、客觀、不得涂改和偽造。

 

 

六、實驗室檢測記錄與報告管理規(guī)范
1

記錄

 

記錄是為已完成的活動或達到的結果提供客觀證據(jù)的文件。記錄的作用主要是為檢測工作的質(zhì)量效用提供客觀證據(jù),為預防和糾錯溯源提供依據(jù)。

 

1.1 記錄的基本要求

⑴檢測測試過程的基本步驟和依據(jù);

⑵參加檢測人員的資格;

⑶檢測使用的儀器設備及場地;

⑷檢測實驗環(huán)境條件;

⑸檢測分析的數(shù)據(jù);

⑹檢測分析結果的判斷;

⑺檢測實驗的結論等。

 

1.2 記錄種類

凡對檢測工作質(zhì)量和質(zhì)量體系運行有效性有關的、需要證實的所有方面,都必須認真做好記錄。

與檢測質(zhì)量有關的記錄分為技術記錄和質(zhì)量記錄兩類。

⑴技術記錄

技術記錄是進行檢測所得數(shù)據(jù)和信息的積累。包括檢測過程的原始記錄、導出數(shù)據(jù)(簡稱原始記錄)、合同、任務單,以及與檢測工作相關的技術方案、采樣點設置圖等說明資料。

⑵質(zhì)量記錄

質(zhì)量記錄是客觀反映質(zhì)量或質(zhì)量體系運行過程的信息載體,主要包括質(zhì)量體系內(nèi)審和質(zhì)量管理評審的記錄與報告、質(zhì)量監(jiān)督、儀器設備運行檢查、儀器設備和計量標準檔案、人員培訓記錄檔案、申訴以及糾正措施或預防措施等。

 

1.3 記錄管理

⑴所有的記錄必須指定專人負責管理;

⑵制訂各類記錄的保存期限;

⑶涉及客戶的記錄應制定保密措施,以保護客戶信息和所有權;

⑷記錄應保存在適宜的環(huán)境及設施中,有效防止污損、變質(zhì)、蟲蛀和丟失;

⑸記錄的維護管理、查閱或借閱應符合保護客戶信息和所有權程序要求;

⑹超過保管期限的記錄,由管理人員造冊,經(jīng)批準后,按有關程序予以處理。

 

1.4 檢測原始記錄規(guī)范

原始記錄是編制檢測報告的主要依據(jù),也是必要和可能時再現(xiàn)試驗的依據(jù),因此必須記錄完整、真實、清楚,對涂改應作出統(tǒng)一規(guī)定。原始記錄除試驗數(shù)據(jù)和觀察記錄外,還要對所用儀器設備、標準物質(zhì)、環(huán)境條件、試驗參數(shù)、樣品編號及其狀態(tài)、測試過程中的異,F(xiàn)象進行如實記錄。

檢測原始記錄是檢測工作活動軌跡的客觀證據(jù),是形成檢測報告的原始憑證,因此必須規(guī)范化。

⑴原始記錄信息要完整。

原始記錄應包括以下內(nèi)容:

a)檢測的方法依據(jù);

b)使用的儀器設備名稱、型號及編號;

c)檢測時的被測樣品標識;

d)檢測時的環(huán)境條件;

e)檢測觀察結果、數(shù)據(jù)及其計算;

f)檢測人員和復核人員簽字;

g)其他必要的說明。

⑵原始記錄填寫人員應準確、規(guī)范、完整、客觀地記錄相關內(nèi)容,不得使用鉛筆書寫;

⑶原始記錄因筆誤或計算錯誤需要更改時,應按規(guī)定的程序進行修改。如使用單桿劃去原數(shù)據(jù),在其右上方寫上正確數(shù)據(jù),并有更改人的簽章;

⑷正確使用法定計量單位;

⑸使用統(tǒng)一格式的原始記錄。

 

2

報告

檢測報告是檢測機構向客戶提供的最終產(chǎn)品,也是檢測機構工作質(zhì)量的最終體現(xiàn),因此檢測機構應準確、清晰和客觀報告進行的每一項檢測結果。

 

2.1 檢測報告基本要求

⑴檢測報告的編制應符合國家有關法律法規(guī)及檢測機構所建立的質(zhì)量體系文件的規(guī)定;

⑵報告中所使用的術語、定義應與現(xiàn)行有效的國家標準、技術規(guī)范一致;

⑶使用法定計量單位;

⑷檢測數(shù)據(jù)的處理與表達方式應與現(xiàn)行有效的國家標準、技術規(guī)范一致;

⑸必須加蓋相關的印章;

⑹若有分包項目應注明,必要時可詳細說明。

 

2.2 檢測報告內(nèi)容

檢測報告應包括以下信息:

a)標題;

b)檢測機構名稱、地址及聯(lián)系電話;

c)檢測報告唯一性標識,報告總頁數(shù)及頁碼;

d)客戶的相關信息;

e)檢測樣品的描述說明和明確標識;

f)檢測樣品的特性及狀態(tài);

g)檢測方法技術依據(jù)及說明;

h)檢測儀器設備及檢測環(huán)境條件;

i)檢測的結果,并適當輔以表格或簡圖加以說明;

j)報告批準(或經(jīng)授權)人、審定人(適用時)、審核人、編制人的簽字或等同的標識;

k)報告的有效性聲明;

l)對估算的監(jiān)測結果不確定度的說明(如果適用);

m)特定方法、客戶要求附加的信息(適用時)。

 

2.3 檢測報告審核與簽發(fā)

⑴報告審核

檢測報告在簽發(fā)前必須進行校對和審核。校對主要是對數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)移、計算處理及報告內(nèi)容差漏進行校對;審核是對報告的完整性、項目的齊全性、依據(jù)的正確性以及結論的正確性進行審查,審查內(nèi)容包括:

①檢測所依據(jù)的標準、方法、指導書的有效性;

②檢測所依據(jù)方法、儀器設備、環(huán)境條件選用、數(shù)據(jù)計算以及所有文字、符號、計量單位的正確性;

③報告的檢測結果與檢測原始記錄的一致性;

④報告內(nèi)容及其檔案要件的完整性;

⑤報告結論的正確性及報告編制的規(guī)范性。

⑵報告簽發(fā)

經(jīng)審核的檢測報告由法人或其授權簽字人簽發(fā),同時應指定專人負責待發(fā)檢測報告的管理,實行領用登記制度。

有關人員從報告編制、審核到發(fā)布或傳遞檢測報告均應遵循保護客戶信息和所有權程序的相關規(guī)定。

 

報告由檢測機構的負責人或其授權簽字人簽發(fā),對于授權簽字人應滿足以下要求:

①相應授權簽字領域的資格和經(jīng)驗;

②能參與監(jiān)督日常報告產(chǎn)生的關鍵過程;

③熟悉檢測標準與檢測程序(包括理論基礎知識和技術領域的實際能力);

④能對檢測結果進行科學的分析評價;

⑤熟悉質(zhì)量標準體系的知識;

⑥熟悉評審機構方針、政策以及對實驗室的有關要求;

⑦有足夠的時間參與實驗室工作,熟悉實驗室質(zhì)量體系和業(yè)務工作的開展。

 

2.4 檢測報告更改

檢測報告的更正是指對檢測機構已簽發(fā)批準送達客戶后,因出現(xiàn)下列原因之一需要對檢測報告進行的更正或補充。

①發(fā)現(xiàn)檢測報告對應的檢測儀器設備出現(xiàn)問題,且已影響到該檢測報告所涉及的檢測結果;

②發(fā)現(xiàn)由于采用了不正確或不完善的檢測方法,導致檢測結果有誤;

③發(fā)現(xiàn)出具的檢測報告有其他錯誤;

④為滿足客戶的合理要求。

報告的更改可采用以下方式:

①發(fā)布一個新的檢測報告,以替代原檢測報告。新報告應有新的編號,并標明替代的舊報告號;

②以"報告的更改或補充的通知"的形式通知客戶(尤其是采用電子傳輸時),應統(tǒng)一編制這種文件格式。

 

2.5 檢測報告結論評價用語模式的建立

⑴所檢項目全部合格

模式:該樣品所檢項目符合GB×標準。

舉例:該樣品所檢項目符合GB 2717-2018 食品安全國家標準 醬油。

 

⑵所檢項目全部不合格

模式:該樣品所檢項目不符合GB×標準。

舉例:該樣品所檢項目不符合GB 2717-2018 食品安全國家標準 醬油。

 

⑶所檢項目少數(shù)不合格

模式:該樣品所檢項目中×不符合GB×標準,其余項目合格。

舉例:該樣品所檢項目中氨基酸態(tài)氮不符合GB 2717-2018 食品安全國家標準 醬油,其余項目合格。


⑷所檢項目少數(shù)合格

模式:該樣品所檢項目中×符合GB×標準,其余項目不合格。

舉例:該樣品所檢項目中砷符合GB 2717-2018 食品安全國家標準 醬油,其余項目不合格。

 

⑸參照標準評價

模式:參照GB×標準,該樣品所檢項目…,即先加入"參照GB×標準",其后與上述相同。

編輯:songjiajie2010

 
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