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微量移液器的使用、校驗及維護保養(yǎng)

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2018-12-21  來源:食品微生物檢測儀器設備性能校驗和維護手冊
核心提示:微量移液器是一種移取微量液體的新型實驗工具,是進行生化實驗、微生物學實驗和分子生物學實驗的必備工具。移液器為量出式量器,分
 微量移液器是一種移取微量液體的新型實驗工具,是進行生化實驗、微生物學實驗和分子生物學實驗的必備工具。移液器為量出式量器,分定量移液器和可調移液器兩大類。其型式分為單頭型和多頭型。微量移液器主要包括手動移液器和電子移液器兩種。微量移液器的容量規(guī)格范圍為0.1uL~5mL,滿足液體的精確取樣和轉移的需要。微量移液器是一種移取微量液體的新型實驗工具,是進行生化實驗、微生物學實驗和分子生物學實驗的必備工具。移液器為量出式量器,分定量移液器和可調移液器兩大類。其型式分為單頭型和多頭型。微量移液器主要包括手動移液器和電子移液器兩種。微量移液器的容量規(guī)格范圍為0.1uL~5mL,滿足液體的精確取樣和轉移的需要。


 

移液器操作及注意事項

 

(一)設定取液值

移液器為活塞式吸管,以活塞在活塞套內移動的距離確定移液器的容量,利用空氣排放的原理進行工作。移液器的容量即移液量,在移液器把柄的顯示窗上可清楚顯示。

 

轉動移液器的調節(jié)旋鈕可進行移液量的設定:反時針方向轉動旋鈕,可提高取液量;順時針方向轉動旋鈕,可降低取液量。調整旋鈕時不要用力過猛,還應注意移液器顯示的數(shù)值不應超過其可調范圍。

 

(二)吸液

(1)選擇吸頭放在移液器套筒上,稍加壓力使其與套筒之間無空氣間隙。

(2)把按鈕壓至第一停點【見圖2a)】,垂直握持加樣器,使吸頭浸入液面下3mm~5mm處,然后緩慢平穩(wěn)地松開按鈕,吸入液體[見圖2-2b)]。等待1s~2s后從液體中取出。

 

(三)放液

(1)將吸頭口貼到容器內壁底部并保持傾斜,平穩(wěn)地把按鈕壓到第一停點[見圖2-2e)],等待1s~2s再把按鈕壓到第二停點以排出剩余液體[見圖2-2d)]

(2)壓住按鈕,同時提起加樣器,使吸頭貼容器壁擦過[見圖2-2d]。松開按鈕[見圖2-2e)],按吸頭彈射器除去吸頭。

 

(四)微量移液器的操作注意事項

(1)勿將微量移液器本體浸入溶液中。

(2)如吸取黏度高的試液,可先將微量移液器頭尖端以刀片或剪刀將出口切大,并先行預潤后再吸取。

(3)吸取酸液或具腐蝕性溶液后,將微量移液器拆解開,各部位零件以蒸餾水沖洗干凈,擦干后再正確組合回復原狀。

(4)微量移液器的任何部分切勿用火燒烤,也不可吸取溫度高于70℃的溶液,避免蒸氣侵入后腐蝕活塞。

(5)套有微量移液器頭的微量移液器,無論微量移液器頭中是否有溶液,均不可平放,需直立架好。

(6)若不小心使溶液進入吸管柱內時,應盡快予以拆解,將活塞組件、吸管柱、O型圈、鐵氟龍墊等各部位以清水沖洗干凈后,再以酒精擦拭,擦干后再正確組合回復原狀。

 


 

 

微量移液器的性能校驗

 

(一)氣密性檢測

移液器吸滿液體后,手持垂直放置15s,檢查吸嘴的尖頭有無液滴,如有,則說明漏氣。

 

(二)準確性檢測

1.量程小于1uL,建議使用分光光度法檢測。將移液器調至目標體積,然后移取染料溶液,加入一定體積的蒸餾水中,測定溶液的稀釋度(334nm或340nm),重復幾次移液操作,計算移液器的精確度。

2.量程大于1uL,可以用稱重法檢測。通過對水的稱重,轉換成體積(體積=質量/密度),鑒別移液器的準確性。由水的密度是隨著溫度交化而變化,且稱量天平本身精確度不符合檢測要求,檢測又大多在一個開放式空間操作,偏差在所難免。因面,此種稱量只能現(xiàn)場粗略地判斷移液器的確性進一步的校準必須在專業(yè)的實驗室操作進行。

 

注意:稱重法實驗室必備條件是高度靈做的分析天平(定期校準)、雙蒸水和稱量容器。水、移液器和吸嘴必須具有相同的溫度(20℃時水的密度為0.0982g/cm3)。

 

(三)專業(yè)校準

移液器經(jīng)過長期使用,彈簧的彈力會發(fā)生變形,加之本身又是塑料材質不耐磨擦,因而就會產(chǎn)生誤差。為了保證移液器傳遞液體量的準確性,必須對移液器進行定期校準。為了更好地發(fā)揮該類計量儀器的作用,對新購進的儀器要進行校準后才能使用:對正在使用的計量儀器,由于長期使用會造成示值與度量對象的誤差,這種誤差若不及時校正,必定會影響測試和科研工作,因此,對使用的移液器要定期檢定、校正,并建立檔案,只有這樣才能使移液器在日常工作中更好的發(fā)揮作用。

 

目前,在許多實驗室條件下進行的常規(guī)檢測并不能完全取代專業(yè)的校準工作,因為校準對于外部環(huán)境、工作條件及使用的精密儀器具有較高的技術要求,而這些條件往往是大多數(shù)實驗室無法提供的,F(xiàn)在一些大型的移液器制造商均采用全球統(tǒng)一的移液器標準操作規(guī)范,通過計算機對分析天平的測量,數(shù)據(jù)采集、計算、結果評價等環(huán)節(jié)進行在線控制,即利用專業(yè)軟件校正控制系統(tǒng)完成。也就是說所有的人為操作都被計算機記錄并隨報告打印出來,而電腦對數(shù)據(jù)的評估認證也是在同期進行并完成的,完全排除了人為操縱校準結果的可能性。

 

(四)微量移液器的標定

合格的移液器在使用一段時間后,由于敲打、磨損或液體吸入吸管柱內等原因均有可能導致其精確度下降,因此需進行標定。移液器1年至少標定1次。蒸餾水稱量法標定移液器則是常用的方法。

 

1.標定條件

室溫(20℃士5℃);蒸餾水水溫與室溫溫差不得大于2℃。


2.步驟

(1)將移液器調至擬定校準體積,選擇合適的吸頭。

(2)根據(jù)核查點選擇天平,見表2-1。

(3)將稱量杯放入天平中,待天平顯示穩(wěn)定后,調零。

(4)來回吸吹蒸餾水3次,使吸頭濕潤,用紗布拭干吸頭。

(5)垂直握住移液器,將吸頭浸入液面2mm~3mm處,緩慢地吸取蒸餾水。

(6)將吸頭離開液面,去掉外部的液體。以30°放入稱量杯中,緩慢地將移液器壓到第1擋,等待1s~3s,再壓到第2擋,使吸頭里的液體完全排出。

(7)記錄稱量值。

(8)擦干吸頭表面。

(9)重復3次移取及稱量,取平均值計算移液器的容量允許誤差及重復性。

(10)多量程移液器應根據(jù)實際量程進行3點核查。

(11)填寫和保存校準記錄。

 

3.計算方法

(1)實際容量的計算

移液器在標準溫度20℃時的實際容量由式(2-3)計算:

V20=m×Z(t)…………………(2-3)

式中:

V20一標準溫度20℃時移液器的實際容量,mL;

m一移液器移取的蒸餾水表觀質量,g;

Z--Z因子,由表2-2査得,cm3/g;

t一核查時蒸餾水的溫度,℃。

表2-2蒸餾水在不同溫度和壓強下的Z因子

 

(2)容量相對誤差的計算

式中:

E--容量相對誤差,%;

V一標稱容量,uL;

3次測量的算術平均值,uL;

計算結果保留2位有效數(shù)字。

 

(3)容量重復性的計算

計算公式見下式:

 




 

計算結果保留2位有效數(shù)字

 

4.核查結果判定

不同量程移液器的核査點及其在標準溫度20℃時的容量允許誤差與重復性應符合JJG646《移液器檢定規(guī)程》要求。單量程、特殊量程移液器參照相應核查點進行核查。

 

5.核查結果處理

如果出現(xiàn)任意核查不符合要求的情況,應立刻換人進行第二次核查,如第二次核查仍不符合要求,則停止使用該移液器,并加貼紅色停用標簽,同時申請外部計量檢定。

 

 


 

 

微量移液器的維護及保養(yǎng)

 

1.維護

(1)移液器不用時,應在專用支架上豎直放置。

(2)每天使用前,應檢查移液器外表面是否有灰塵和污物,要注意移液器的嘴錐處,只能用70%的酒精溶液清潔。

(3)如液體不小心進入活塞室應及時清除污染物。

(4)根據(jù)使用頻率,所有的移液器應定期用肥皂水清洗,或用60%的異丙醇消毒,再用雙蒸水清洗并晾干。

(5)移液器使用完畢后,把移液器量程調至最大值,且將移液器垂直放置在移液器架上。

(6)避免放在溫度較高處以防變形致漏液或不準。

(7)使用時要檢查是否有漏液現(xiàn)象。

方法是吸取液體后懸空垂直放置幾秒,看看液面是否下降。如果漏液,原因大致有以下幾方面:

①槍頭是否匹配。

②彈簧活塞是否正常。

③如果是易揮發(fā)的液體(許多有機溶劑都如此),則可能是飽和蒸汽壓的問題,可以先吸放幾次液體,然后再移液。

 

2.保養(yǎng)

經(jīng)常使用的移液器,每半年應保養(yǎng)一次。從移液器的拆卸開始,步驟如下:

(1)按下管嘴推頂桿,將配置工具的尖端插入推頂桿底部的槽孔中,拔出管嘴推桿軸套和管嘴推頂桿。

(2)用配置專用工具反時針方向轉動嘴錐并拆下,拔出柱塞桿。

(3)從嘴錐桿上拆下O型圈。注意5uL~50uL的移液器有兩個O型圈,可利用柱塞桿的細端拆下它們。

(4)用一塊干燥無絨布清潔柱塞桿、柱塞彈簧和O型圈,檢查柱塞體是否有灰塵顆粒。

(5)擦凈零件并涂上高真空活栓脂膏,將各零件重新組裝成移液器。

(6)重新檢定。


編輯:songjiajie2010

 
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