亚洲成aⅴ人在线观看_亚洲欧美日韩综合一区在线观看_国产无码电影一区二区三区_国语精品91自产拍在线观看二区

食品伙伴網(wǎng)服務(wù)號
當(dāng)前位置: 首頁 » 檢驗技術(shù) » 食品微生物檢驗技術(shù) » 正文

GB 4789.3-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗 大腸菌群平板計數(shù)-常見問題

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2024-08-19
核心提示: 常見問題匯總 01VRBA培養(yǎng)相關(guān)問題 1)所用器皿是否需要滅菌? 不需要。配制培養(yǎng)基所用到的錐形瓶、玻璃棒、
 常見問題匯總

 

01

VRBA培養(yǎng)相關(guān)問題

 

1)所用器皿是否需要滅菌?

 

不需要。配制培養(yǎng)基所用到的錐形瓶、玻璃棒、勺子等均不需要滅菌。但必須清洗干凈,表面無污漬、無殘留。煮沸完成后,取下錐形瓶,用一般常用的軟紙覆蓋瓶口,并橡皮筋纏繞,待冷卻至適宜溫度后,即可傾注培養(yǎng)基。在傾注培養(yǎng)基時,須點燃酒精燈,稍微灼燒錐形瓶口。

 

2)如何保持“煮沸2min”?

 

可以用電磁爐或者電熱板進(jìn)行加熱煮沸,在該培養(yǎng)基即將煮沸時調(diào)低溫度。實際操作時,不需要嚴(yán)格按照此要求進(jìn)行,加熱煮沸數(shù)秒即可。因為本培養(yǎng)基很難保持煮沸2min,一旦煮沸,則培養(yǎng)基很快上涌、翻騰,若不調(diào)低問題或及時采取其它措施,則培養(yǎng)基很有可能在數(shù)秒內(nèi)噴涌出來,嚴(yán)重者可噴涌2米以上、電磁爐周圍1-2米范圍內(nèi)都是培養(yǎng)基飛濺的范圍。

 

3)若培養(yǎng)基未用完,是否可以冷藏起來下次用?

 

不可以。4789.28中已規(guī)定,固體培養(yǎng)基最多允許熔融一次,并且特指經(jīng)過高壓霉菌冷卻后的培養(yǎng)基還可以熔融一次后使用。且VRBA培養(yǎng)基冷卻后,再次熔融后非常容易噴涌,若溫度控制不當(dāng),底部培養(yǎng)基熔融后很快就會發(fā)生噴涌,即培養(yǎng)基未完全熔融就會發(fā)生噴涌現(xiàn)象。

 

4)傾注完成后是否需要“覆蓋一層"?如何覆蓋?

 

一般情況下不需要覆蓋。在實際操作過程中,若檢驗員初次接觸該樣品類別,則因為不確定是否會發(fā)生菌落蔓延,所以有必要在傾注培養(yǎng)基的時候再覆蓋一層,但如此反復(fù)多次測試后,若樣品中不存在菌落蔓延情況,則以后的檢驗中都不需要進(jìn)行覆蓋。若重復(fù)多次測試后都有蔓延情況,則以后的檢驗中都需要覆蓋,應(yīng)該在原培養(yǎng)基已凝固或半凝固時再傾注一層培養(yǎng)基。

 

02

如何確定培養(yǎng)基上長得是不是大腸菌群?

 

建議新手們認(rèn)真按照標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行證實實驗,此證實實驗操作簡單,每一次VRBA上有菌落生長都進(jìn)行證實實驗,如此往復(fù)3-4次,對于哪種形態(tài)才是大腸菌群均可了然于心。

 

03

兩個梯度都漲了菌,如何選?

 

選取15-150CFU之間的平板,挑選可疑菌落進(jìn)行證實實驗。舉例如下:

 

若兩個連續(xù)梯度的4個平板上都要挑取菌落進(jìn)行證實實驗,實際操作時,可靈活操作,如1:10的兩個平板上的菌落數(shù)分別為120、123,1:100的兩個平板的菌落數(shù)分別為16,18,嚴(yán)格來講必須至少在每個平板上分別挑取10個可疑菌落和10個典型菌落進(jìn)行證實實驗,如此需要40根GBLB肉湯管。建議使用鎳合金接種環(huán),以為VRBA上生長的菌落大部分在底層、且菌落一般比較大,被培養(yǎng)基覆蓋,傳統(tǒng)的接種環(huán)較細(xì),用以刮去上層培養(yǎng)基比較方便,挑取菌落也比較方便。

 

 

04
如何進(jìn)行證實實驗,菌落選取數(shù)量?

 

 

建議新手們VRBA上的所有不同形態(tài)的菌落都進(jìn)行證實實驗。每種不同形態(tài)都挑取5-10個進(jìn)行證實實驗(BGLB管足夠,建議多挑選幾個進(jìn)行實驗)。

 

注意:A. 每種可疑菌落挑取5個,每個菌落放入1根GBLB管中;B. “產(chǎn)氣者,記為大腸菌群陽性管‘’,就要求在實驗前必須認(rèn)真篩選BGLB管,凡產(chǎn)氣的GBLB管應(yīng)棄去不用。

 

05

結(jié)果如何計算?

 

首先,在VRBA培養(yǎng)24h后進(jìn)行計數(shù),分別計數(shù)可疑大腸菌群和典型大腸菌群的數(shù)量。假如在1:10的平板上的可疑大腸菌群有10個,典型大腸菌群有6個;然后進(jìn)行證實實驗,假如10個可疑大腸菌群中有3個證實為陽性,6個典型大腸菌群中有5個證實為陽性,則計算方法如下:最終大腸菌群數(shù)=經(jīng)證實的大腸菌群數(shù)=可疑大腸菌群經(jīng)證實的數(shù)量+典型大腸菌群經(jīng)證實的數(shù)量=10×(3/10)×10+6×(5/6)×10=80。

 

06

若平板上有很多菌落,最終證實全部為陰性,結(jié)果如何計算?

 

選取適宜菌落數(shù)的平板挑取菌落進(jìn)行證實試驗,若證實全部為陰性,則需要再挑取更低稀釋度的平板上的菌落,建議可疑和典型菌落分別挑取10個進(jìn)行驗證試驗,若第二次證實實驗均呈陰性,以<1乘以最低稀釋度進(jìn)行計算。

編輯:songjiajie2010

 
分享:
 

 
 
推薦圖文
推薦檢驗技術(shù)
點擊排行
檢驗技術(shù)
 
 
Processed in 0.033 second(s), 12 queries, Memory 0.99 M