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如何選擇培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間?

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2020-03-16  來源:食品微生物檢驗公眾號
核心提示:微生物EM(環(huán)境監(jiān)測)檢測中最常遇到的問題之一與培養(yǎng)策略和培養(yǎng)基的選擇有關(guān)。使用一種培養(yǎng)基(TSA)或者兩種培養(yǎng)基(TSA和SDA)
 微生物EM(環(huán)境監(jiān)測)檢測中最常遇到的問題之一與培養(yǎng)策略和培養(yǎng)基的選擇有關(guān)。

 

使用一種培養(yǎng)基(TSA)或者兩種培養(yǎng)基(TSA和SDA),使用單個溫度、兩個溫度,是否從低溫到高溫,還是高溫到低溫。影響微生物回收率的因素有:結(jié)果觀察時間(單一溫度通常比兩個溫度早)、成本(只用TSA比使用TSA+SDA便宜)以及微生物回收率的高低。很少有研究報告回收率相關(guān)的培養(yǎng)條件選擇,但是,已有報告單一溫度條件30-35℃培養(yǎng)對于霉菌回收的不如兩個溫度培養(yǎng)的好。下面的數(shù)據(jù)總結(jié)了在我們實驗室進行的一項小研究。

 

采用標準TSA LP80培養(yǎng)基、分別使用30-35℃@5天、25-30℃@5天、20-25℃@72小時+30-35℃@48小時3種方案進行評價。以SDA培養(yǎng)基20-25℃@5天條件為對照,對霉菌的回收情況進行評價。

 

這些樣本是從生產(chǎn)車間入口附近的非受控區(qū)域采集的,以確保足夠高的計數(shù)以獲得合適的數(shù)據(jù)大小。在每個地點取3個表面接觸皿和1個浮游菌(1立方SAS180),每天取12個點。每個點取3組重復(fù)樣本,每個培養(yǎng)溫度測試1組樣品。實驗2中還收集了SDA樣本。樣本分別在12月至1月,以及9個月后的8月至9月采集,以覆蓋季節(jié)變化。培養(yǎng)后對每組樣品進行計數(shù),以確定菌落計數(shù)。在實驗2中,三位分析員還計算了每個組的霉菌菌落數(shù),并計算了每個樣本的平均值。

 

 

1、在試驗1的3天內(nèi),在每種培養(yǎng)策略下檢測到的細菌菌落總數(shù)

 

 

2、在試驗2的8月至9月的3天內(nèi),在每種培養(yǎng)策略下檢測到的細菌菌落總數(shù)

 

總的來說,25-30℃的單一溫度日變化最小,可能比其他2種方法回收了更多的菌落。這種類型的測試存在相當大的差異,因此需要研究更大的面以獲得更可靠的數(shù)據(jù)集。

 

 

霉菌檢測

 

在整個試驗過程中,每個試驗點霉菌菌落的發(fā)生頻率都被記錄下來。結(jié)果如圖3所示。正如我們所看到的那樣,SDA(22.5℃)回收了大部分的菌落,組合溫度(25-30℃+30-35℃)次之,然后是25-30℃,最后是30-35℃。在30-35℃條件下,回收率小于SDA(22.5℃)的1%。

 

 

3.在3天的試驗中,每種培養(yǎng)策略檢測到的霉菌菌落總數(shù)

 

總結(jié)

 

如果成本是驅(qū)動因素,那么單一培養(yǎng)基,組合溫度培養(yǎng)(從低到高)的TSA是最佳選擇。如果速度是主要的要求,那么25-30℃的單一溫度是最好的。如果需要全部回收,那么優(yōu)選2種培養(yǎng)基,TSA和SDA。

編輯:songjiajie2010

 
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